| 查看: 725 | 回复: 2 | |||
monkey514至尊木虫 (知名作家)
多重人格的虫子
|
[求助]
求助适宜的分离方法，高手请指导小虫
|
|
小虫最近开始进行了一下预实验，对提取所获得浓缩液分别用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇及水萃取，获得了四个层，并对这四个层进行了大体的TLC及化学分析，现将各层的结果附上，展开的条件分别是： 氯仿层：CHCl3:MeOH=9:1 乙酸乙酯层：CHCl3:MeOH=3:1+2滴醋酸 正丁醇层：CHCl3:MeOH:H2O=7:5:0.5+2滴醋酸 水层：CHCl3:MeOH:H2O=4:6:1.5+2滴醋酸 图片为四块薄层板合并的，从左到右依次是硫酸乙醇显色、Fecl3显色、25%磷钼酸显色、溴酚蓝显色 Molish反应全部层均阳性，盐酸镁粉反应在乙酸乙酯层和正丁醇层阳性，并且乙酸乙酯层颜色很重 现在想对这四个层进行分离，感觉里面酚酸类、黄酮类、三萜或甾体类的糖苷很多，于是想分析一下合适的方案，现在自己提出的方案如下： （1）氯仿层：采用制备薄层取得四个主斑点 （2）乙酸乙酯层：成分较多，采用硅胶柱大梯度洗脱（氯仿：甲醇=100:0、100:1、100:2、100:3、100:4、100:5、100:6、100:7、100:8、100:9、10:1、8:1、6:1、4:1、2:1、纯甲醇、水）结合Sephadex LH-20 （3）正丁醇层：成分较多，硅胶柱大梯度洗脱（氯仿：甲醇=100:0、100:1、100:2、100:3、100:4、100:5、100:6、100:7、100:8、100:9、10:1、8:1、6:1、4:1、2:1、纯甲醇、水）结合Sephadex LH-20、反相ODS柱色谱反复 （4）水层：反相ODS柱色谱或制备薄层取得三个主斑点 但是上述方案总觉得不完善，欠缺很多东西，求高手指导！小虫拜谢！  氯仿层  乙酸乙酯层  正丁醇层  水层 |
回复此楼» 猜你喜欢
职称评审没过，求安慰
已经有41人回复
-
回收溶剂求助
已经有7人回复
-
硝基苯如何除去
已经有3人回复
-
A期刊撤稿
已经有4人回复
-
垃圾破二本职称评审标准
已经有17人回复
-
投稿Elsevier的Neoplasia杂志，到最后选publishing options时页面空白，不能完成投稿
已经有22人回复
-
EST投稿状态问题
已经有7人回复
-
毕业后当辅导员了，天天各种学生超烦
已经有4人回复
-
求助文献
已经有3人回复
-
三无产品还有机会吗
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助油水分离方法
已经有12人回复
- 【求助】化学方法分离有机物 急 复试题
已经有7人回复
- 【求助】泪求啊 泪求啊 有没有蛋白达人指导下做磷酸蛋白分离，跑柱子的话，用什么柱子
已经有6人回复
- 【求助】求“粉末固体”与去离子水反应时，即时停止并且分离的方法。
已经有5人回复
- 【求助】如何分离甲醇和苯，请高手指教
已经有13人回复
- 【求助】炭和二氧化硅分离方法
已经有12人回复
- 【求助】二乙醇胺的分离方法
已经有13人回复
- 【求助】复方中三七有效成分（皂苷类）的提取分离纯化方法
已经有9人回复
- 【求助】请高手指点C18自制小柱分离方法
已经有4人回复
- 【求助】请问各位高手在分离离子型样品时添加四丁基氢氧化铵的作用是什么？
已经有12人回复
鸭绿江畔
铁杆木虫 (著名写手)
牛B
- 应助: 839 (博后)
- 贵宾: 0.384
- 金币: 12353.3
- 红花: 83
- 帖子: 1723
- 在线: 656.6小时
- 虫号: 294537
- 注册: 2006-11-09
- 性别: GG
- 专业: 天然药物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
monkey514(金币+5): ★★★★★最佳答案, 非常感谢，很长时间没做分离了，忘差不多了，真是一语点醒梦中人啊 2012-03-13 16:26:13
monkey514: 回帖置顶 2012-03-13 16:26:18
感谢参与，应助指数 +1
monkey514(金币+5): ★★★★★最佳答案, 非常感谢，很长时间没做分离了，忘差不多了，真是一语点醒梦中人啊 2012-03-13 16:26:13
monkey514: 回帖置顶 2012-03-13 16:26:18
|
1.先告诉你，氯仿层不可以用制备薄层的方式拿到那四个点。因为那四个点有可能代表了四种极性相近的一类物质，最好的办法就是用hplc看看含有多少东西。所以这一层的物质，一样也得反复柱层析才能搞定。 2.乙酸乙酯层有必要把梯度跑的那么细吗？你可以用薄层板都试一遍，你自然就知道哪些梯度可以跑，那些梯度根本就不用跑。 3.正丁醇层建议你先用大孔树脂过一遍，除除糖一类的物质，不同比例的醇系脱下来的物质收集后，再点板摸条件，上硅胶柱。如果你试验条件非常好的话，建议这层直接用ODS填料处理。效果比大孔树脂还好。 我的经验是，不要被薄层板的假象给迷惑了。等你过完第一遍硅胶柱时，你会发现，薄层板上多了很多你在预实验的时候都没发现的点。 想分化合物的话，就得不停的过柱子，不停的点板，没啥捷径可走。 4.水层嘛，处理方式同正丁醇层没区别。 |
2楼2012-03-13 16:03:28
3楼2012-03-13 16:23:40