24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4406)
>虫友互识 (578)
>导师招生 (476)
>找工作 (288)
>文献求助 (279)
>论文投稿 (246)
>职场人生 (243)
>考博 (146)
>休闲灌水 (143)
>考研 (105)
>博后之家 (86)
>硕博家园 (86)
>学术会议 (76)
>招聘信息布告栏 (66)
>医学 (61)
>有机交流 (32)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

应助: 6 (幼儿园)
贵宾: 1.049
金币: 8848.4
散金: 606
红花: 72
沙发: 2
帖子: 2137
在线: 278.8小时
虫号: 1397074
注册: 2011-09-10
专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 琼脂糖凝胶电泳跑的时间长了是不是就会出现拖尾呀？

我昨天跑了个琼脂糖凝胶电泳，1%的，胶配的挺长，多跑了一倍的时间，跑了一会我拿出来看了看，条带很好，我又放进去跑了会儿，然后就拖尾了，是跑的时间太长造成的吗

回复此楼

» 猜你喜欢

TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析已经有0人回复
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有203人回复
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点已经有0人回复
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记已经有0人回复
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点已经有0人回复
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用已经有0人回复
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项已经有0人回复
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展已经有0人回复
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点已经有0人回复
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征已经有0人回复

好孩子！

1楼 2012-03-11 09:42:21

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zbxky

铁虫 (小有名气)

应助: 6 (幼儿园)
金币: 62.5
红花: 1
帖子: 66
在线: 10.8小时
虫号: 4030422
注册: 2015-08-20

1. PCR产物出现拖尾的因素有很多，总结为一条，就是非特异性扩增过多。原因可能是：
（1）模板不纯：纯化模板
（2） Buffer不合适：更换Buffer
（3）退火温度偏低：适当提高退火温度
（4）酶量过多：适量用酶，或调换另一种酶
（5） dNTP、Mg2+浓度偏高：适当降低dNTP和镁离子的浓度
（6）循环次数过多：减少循环次数
（7）模板量少或引物量过多：增加模板量，减少引物的用量

2. 提质粒的时候经常有这种个现象，有可能是样品浓度过高了。这种情况简单，稀释一下就行了。

3. 提基因组DNA的时候也常出现拖尾，最可能的就是提的DNA中掺杂有蛋白质，蛋白质会拽DNA的泳动。所以一定要注意提取基因的操作，减少蛋白质等杂质的出现。

4. 样品破碎或是被降解

5. 存在RNA：DNA前面的一片一般都是未清除的RNA，经过纯化，RNAse处理，就没有了

6. 电泳体系的问题：观察你的marker是否也存在拖尾现象，作为对照
（1）电泳缓冲液TAE或者TBE的污染：。建议更换缓冲液。
（2）上样时样品漂了，建议增加上样缓冲液的用量，以及小心加样。
（3）电压太高：适当降低电压
（4）根据核酸片断大小，适当把加大凝胶浓度。凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。分离小于0.5kb 的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%, 分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%, DNA片段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1.0%。英格恩