应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白浓度测定的经验公式 标题要长啊 才能引起注意
171/2返回列表12下一页
查看: 3564  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zzqbaidu

木虫 (正式写手)

[求助] 蛋白浓度测定的经验公式 标题要长啊 才能引起注意

在网上看到过一个蛋白浓度测定的经验公式，具体是这样的：


280nm和260nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收，在280nm处的吸收比蛋白质强10倍（每克），但核酸在260nm处的吸收更强，其吸收高峰在260nm附近。核酸260nm处的消光系数是280nm处的2倍，而蛋白质则相反，280nm紫外吸收值大于260nm的吸收值。通常：
纯蛋白质的光吸收比值：A280/A260  = 1.8
纯核酸的光吸收比值： A280/A260 = 0.5
含有核酸的蛋白质溶液，可分别测定其A280和A260，由此吸收差值，用下面的经验公式，即可算出蛋白质的浓度。
蛋白质浓度(mg/ml)=1.45×A280－0.74×A260
此经验公式是通过一系列已知不同浓度比例的蛋白质（酵母烯醇化酶）和核酸（酵母核酸）的混合液所测定的数据来建立的。


我想问下有没有人用过这个公式测浓度，用的话发在文章里人家承不承认这种方法啊？我测的是植物蛋白

[ Last edited by zzqbaidu on 2012-3-1 at 14:34 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

生工检测理论与实务

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
帮忙点下我的网站http://www.yayadan.com 欢迎光临！
1楼 2012-03-01 11:33:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzqbaidu

木虫 (正式写手)
自己顶个
回复此楼
帮忙点下我的网站http://www.yayadan.com 欢迎光临！
2楼2012-03-01 18:53:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaxinfish

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zzqbaidu(金币+5): ★★★很有帮助 2012-03-02 08:56:12
这是直接测量法，也有用的，但没有用BCA或者Bradford法测量的准确，所以只能做粗定量，不太准，有条件的话还是要用Bradford/BCA等方法，做实验麽，还是要可靠数据
赞一下 回复此楼
3楼2012-03-01 19:15:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zzqbaidu(金币+5): ★★★很有帮助 2012-03-02 08:56:23
自己实验定量吧   或用 nanodrop
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-01 20:31:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zzqbaidu(金币+5): ★★★很有帮助 2012-03-02 08:56:31
紫外吸收法测蛋白含量，干扰因素多，误差很大，蛋白氨基酸组成不同，e值相差也很大，还是采取其他方法如福林酚法
赞一下 回复此楼
5楼2012-03-02 08:21:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzqbaidu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by jiaxinfish at 2012-03-01 19:15:10:
这是直接测量法，也有用的，但没有用BCA或者Bradford法测量的准确，所以只能做粗定量，不太准，有条件的话还是要用Bradford/BCA等方法，做实验麽，还是要可靠数据

奥，谢谢  ，不过我每次用Bradford法时线性很难达到两个9，您是加了染液多久后测得？
赞一下 回复此楼
帮忙点下我的网站http://www.yayadan.com 欢迎光临！
6楼2012-03-02 09:07:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzqbaidu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by linyingjia at 2012-03-01 20:31:12:
自己实验定量吧   或用 nanodrop

谢谢！
回复此楼
帮忙点下我的网站http://www.yayadan.com 欢迎光临！
7楼2012-03-02 09:07:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzqbaidu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by lzgxgz at 2012-03-02 08:21:19:
紫外吸收法测蛋白含量，干扰因素多，误差很大，蛋白氨基酸组成不同，e值相差也很大，还是采取其他方法如福林酚法

悲剧啊  木有条件啊
赞一下 回复此楼
帮忙点下我的网站http://www.yayadan.com 欢迎光临！
8楼2012-03-02 09:08:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晚香玉

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
进口的BCA稍微准一点，微量的话用Mic BCA。。。标准曲线能达到3个9
赞一下 回复此楼
9楼2012-03-02 10:25:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
其他方法没怎么接触，现在用的是nanodrop 2000
赞一下 回复此楼
10楼2012-03-02 10:51:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zzqbaidu 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭