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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白浓度测定的经验公式 标题要长啊 才能引起注意
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jiaxinfish

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zzqbaidu at 2012-03-02 09:07:34:
奥，谢谢  ，不过我每次用Bradford法时线性很难达到两个9，您是加了染液多久后测得？

j加燃料后等5min，在好像是30min内是稳定的，所以要快点测，不然你的样品容易沉淀。另外做三个重复，可以帮助你的R平方得到99%以上。
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11楼2012-03-02 19:34:05
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一步一步

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2012-08-31 04:51:50
“蛋白质浓度(mg/ml)=1.45×A280－0.74×A260“
不是很准确，我称量BSA稀释成10mg/ml，之后测A280，A260，用上述公式计算得到的浓度在5.657mg/ml，用BCA法测定的浓度在8.122mg/ml，用Nanodrop2000测定的浓度与BCA几乎相同，为8.107mg/ml，以上数据就可以看出楼主提到的公式不是很准确啊。
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12楼2012-08-29 09:08:28
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一步一步

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by linyingjia at 2012-03-01 20:31:12
自己实验定量吧   或用 nanodrop

你好，想问一下：
你有没有用Nanodrop测定过载体蛋白KLH的浓度？？
或者你知不知道一般KLH的消光系数是多大？
还是说这个需要自己测量啊？？
谢谢啊！！
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13楼2012-08-29 09:10:32
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一步一步

木虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by dshlove at 2012-03-02 10:51:15
其他方法没怎么接触，现在用的是nanodrop 2000

你好，想问一下：
你有没有用Nanodrop测定过载体蛋白KLH的浓度？？
或者你知不知道一般KLH的消光系数是多大？
还是说这个需要自己测量啊？？
谢谢啊！！
嘿嘿，看到有用Nanodrop的就像问一下，麻烦了。。。
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14楼2012-08-29 09:12:48
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2012-08-31 04:51:36
引用回帖:
14楼: Originally posted by 一步一步 at 2012-08-29 09:12:48
你好，想问一下：
你有没有用Nanodrop测定过载体蛋白KLH的浓度？？
或者你知不知道一般KLH的消光系数是多大？
还是说这个需要自己测量啊？？
谢谢啊！！
嘿嘿，看到有用Nanodrop的就像问一下，麻烦了。。。...

这个应该是自己测吧，我只是测蛋白浓度。
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15楼2012-08-29 12:31:00
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一步一步

木虫 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by dshlove at 2012-08-29 12:31:00
这个应该是自己测吧，我只是测蛋白浓度。...

那你选择的蛋白浓度测定模式是哪种？？
是protein A280吗？？
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16楼2012-08-29 13:05:08
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2012-08-31 04:52:03
引用回帖:
13楼: Originally posted by 一步一步 at 2012-08-29 09:10:32
你好，想问一下：
你有没有用Nanodrop测定过载体蛋白KLH的浓度？？
或者你知不知道一般KLH的消光系数是多大？
还是说这个需要自己测量啊？？
谢谢啊！！...

只定量过质粒和rna的浓度
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17楼2012-08-29 16:33:39
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