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星光雨露

金虫 (小有名气)

[交流] 肝微粒体代谢问题已有7人参与

我做药物的肝微粒体代谢,为什么加了NADPH辅酶加和没加效果一样呢,加了肝微粒体后的产生了和原药不同的物质,不明白,请各位大侠支招啊!
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mc0326

金虫 (小有名气)


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是不是microsome中除了CYP之外的酶起作用了,有些酶不需要NADPH
2楼2012-03-06 15:38:41
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kkbyb

木虫 (著名写手)


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没有效果表明第一化合物稳定不代谢,第二酶失活,第三孵育条件不对
3楼2012-03-06 16:25:59
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心情一杯

金虫 (小有名气)


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请问楼主,你的孵育条件具体是怎么配的啊?还有你的NADPH是自己配置的还是买的咧?刚接触这一块,还不太懂,请各位支支招啊
4楼2012-03-25 21:00:30
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青木瓜之味

新虫 (小有名气)


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我也是做代谢的,做实验也一直出现这种问题,我把酶灭活后也出现代谢物,我怀疑可能不需要酶的催化,也不需要NADPH的催化。哎
5楼2014-06-25 20:43:52
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青木瓜之味

新虫 (小有名气)


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我的实验一直是这样,不加NADPH和加NADPH的结果一样,愁死啦,可能不需要CYP450酶的催化就能反映
6楼2014-08-05 16:55:33
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wangwei-2014

新虫 (初入文坛)


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求助肝微粒体体外代谢实验,请问你的NADPH发生系统是怎么配的?   尤其是磷酸葡萄糖脱氢酶,我买的是1KU的,配成NADPH发生系统的要求是:含磷酸葡萄糖脱氢酶4U/L,这个怎么配?
7楼2014-09-07 00:13:47
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岳伟东

新虫 (初入文坛)


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加入NADPH酶后有没有产物生成,没有的话那就说明孵育体系设置不当或流动相条件没找好(需重新找流动相条件),有的话你需要用质谱判断下是不是你需要的产物, 肝微粒体中含有含有I相酶和II相酶,你所做的试验是I相酶反应,大多为羟化反应。
8楼2015-10-25 15:03:47
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llw1986

专家顾问 (正式写手)


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我觉得有两种可能,一种就是你这个化合物不需要NADPH就可以进行某种化学反应;另一种可能就是你的NADPH已失活,NADPH最好现用现配

发自小木虫IOS客户端
9楼2015-12-10 14:57:59
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