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Best538

木虫 (小有名气)

[求助] 求助3,5,6-三羟基-3',4',7-三甲氧基黄酮储备液配置问题

最近在做3,5,6-三羟基-3',4',7-三甲氧基黄酮(CAS Number: 99499-83-9)这个化合物的分析,碰到好几个问题,想请教一下大家:
1.溶解度太低。在甲醇溶液中,实测到0.06mg/ml左右的浓度就已经是饱和溶液了;
2.光谱在254nm有最大吸收,但是吸光度也不高;
这样做标曲的时候,倍比稀释到第五个点的时候就已经没有吸收了。210nm下倒是还能手动积分一下,不过黄酮用210做检测波长是不是没有说服力?并且还会碰到吸光度不稳定的问题,同一个浓度,进3次都会RSD大于5%,更别说标曲本身的RSD了。操作应该没问题,混标中的其他化合物都能做到4条9以上的标曲。
因为样品的提取条件是用的纯甲醇,所以标准品储备液也只有用甲醇配了。从化合物结构来看,也是一个挺稳定的结构,实在是不理解为何会出现上边这些问题。麻烦大家都来帮我想想看该怎么解决,才能把这东西的标曲给跑出来。
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懿歟勉旃 勿墮勿忘
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biobiopha_rd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2012-02-29 19:57:18
1)可用一两滴DMSO助溶再加甲醇稀释,可解决溶解性低的问题;
2)该黄酮醇在~350nm左右应该有最强吸收峰,选用此波长可提高检测灵敏度。
2楼2012-02-29 18:38:47
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Best538

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biobiopha_rd at 2012-02-29 18:38:47:
1)可用一两滴DMSO助溶再加甲醇稀释,可解决溶解性低的问题;
2)该黄酮醇在~350nm左右应该有最强吸收峰,选用此波长可提高检测灵敏度。

這是該黃酮的UV譜圖。最大?舛葧r積分面積由150左右。另外,加DMSO對C18填料色譜柱有影響嗎?化合物的保留時間會變嗎?
懿歟勉旃 勿墮勿忘
3楼2012-02-29 20:30:39
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Best538

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Best538 at 2012-02-29 20:30:39:
這是該黃酮的UV譜圖。最大?舛葧r積分面積由150左右。另外,加DMSO對C18填料色譜柱有影響嗎?化合物的保留時間會變嗎?

圖漏了


懿歟勉旃 勿墮勿忘
4楼2012-02-29 20:33:09
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biobiopha_rd

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Best538 at 2012-02-29 20:33:09:
圖漏了
34/dd/520670_1330518762_378.jpg

浓度太稀或太浓都会影响紫外图谱的准确性,浓度应调配到400-1000 mAU为宜。
加1-2滴DMSO不会对色谱柱有什么影响,保留时间影响也非常小,但要注意DMSO有紫外吸收因而也会出峰。
你的紫外谱图应该偏离了真实值,样品浓度太低。
5楼2012-03-01 08:42:16
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