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章信来

木虫 (正式写手)

[求助] 一条成熟mRNA可否翻译两条蛋白?

各位:谁知到一个成熟的mRNA中两个ORF是否都能翻译出蛋白质,有这方面的经典文献没有
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章信来

木虫 (正式写手)

引用回帖:
楼: Originally posted by huguangdong at 2012-02-29 14:56:05:
根据你的描述,没看出来你的情况有什么复杂的,就是两个ORF的表达,除了IRES之外,还有2A序列,当然这都是应用于构建载体上的元件,而且都来自病毒基因组。如果你的意思是哺乳动物基因组本省是否存在这种情况,那 ...

首先谢谢你的热心,基因组上的这种情况是挺正常的。
我也查到些文献证明哺乳动物是可以表达多顺反子mRNA的(randal Jet al,1987),但那是构建的载体,并不存在overlapping现象。存在多ORFs的mRNA中,似乎靠前的upORF都比较小(我的较大),主要对后面较大ORF起到表达调控的作用(kozak,2005年有很好的综述)。我想随着RNA深度测序,这种情况会比较普遍,只是现在还没有发现。同时也不能排除序列分析方法的问题。总之,做个western就可以真相大白。
再次谢谢各位的热情帮助!
8楼2012-03-01 10:10:31
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小周

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流! 2012-02-28 18:10:09
不知道下面这段话能帮助你吗?
IRES双顺反子表达系统
        IRES双顺反子表达系统具有来源于脑心肌炎病毒 (ECMV) 的内核糖体进入位点 (IRES),可以翻译同一条mRNA上的两个开放读码框。核糖体进入mRNA的5′端翻译完目的基因后,直接移动到IRES翻译筛选标记基因或荧光蛋白质

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2楼2012-02-28 15:22:18
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章信来

木虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by 小周 at 2012-02-28 15:22:18:
不知道下面这段话能帮助你吗?
IRES双顺反子表达系统
        IRES双顺反子表达系统具有来源于脑心肌炎病毒 (ECMV) 的内核糖体进入位点 (IRES),可以翻译同一条mRNA上的两个开放读码框。核糖体进入mRNA的5′端 ...

谢谢,我知道IRES序列,我也查到即使没有IRES序列,哺乳动物细胞亦可表达多顺反子序列(表达载体中)
我的情况比较复杂,克隆到的一个mRNA(可变剪切的),编码两个ORF(并且还有overlap),我想知道这两个ORF是否能够同时表达,哺乳动物中可否有类似基因存在?
3楼2012-02-28 21:33:35
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huguangdong

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 章信来 at 2012-02-28 21:33:35:
谢谢,我知道IRES序列,我也查到即使没有IRES序列,哺乳动物细胞亦可表达多顺反子序列(表达载体中)
我的情况比较复杂,克隆到的一个mRNA(可变剪切的),编码两个ORF(并且还有overlap),我想知道这两个ORF是 ...

根据你的描述,没看出来你的情况有什么复杂的,就是两个ORF的表达,除了IRES之外,还有2A序列,当然这都是应用于构建载体上的元件,而且都来自病毒基因组。如果你的意思是哺乳动物基因组本省是否存在这种情况,那肯定,某几个基因的表达共用一个启动子的情况的确存在,有可能是内含子间隔,这不用什么文献,书上就讲得很明白。
5楼2012-02-29 14:56:05
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