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keennes木虫 (著名写手)
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[交流]
研究细胞信号转导通路，建立细胞系，是否一定要敲出细胞内源性蛋白分子？ 已有2人参与
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本人从事细胞内信号转导途径的研究，需要建立一个新细胞系，用EGFP标记某一蛋白分子，以监测该蛋白涉及到的信号途径的信号传递情况。我的建议是：敲出细胞内源性的该蛋白，通过表达构建载体在细胞表达EGFP与该蛋白的融合蛋白，达到精确定量测定信号强弱的目的。但是导师和其他人不同意，认为没有必要。我也就按照他们的意见来做，但我给导师明确说了保留我的意见。后来出了问题，信号果然很弱；增加几倍的激动剂，仍然很弱。但他们仍然认为敲出内源性蛋白没有必要。我很迷茫啊，请牛人给个建议。谢谢了先。 [ 来自科研家族 生物医药家族 ] |
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