24小时热门版块排行榜    

查看: 3282  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

keennes

木虫 (著名写手)

[交流] 研究细胞信号转导通路,建立细胞系,是否一定要敲出细胞内源性蛋白分子? 已有2人参与

本人从事细胞内信号转导途径的研究,需要建立一个新细胞系,用EGFP标记某一蛋白分子,以监测该蛋白涉及到的信号途径的信号传递情况。我的建议是:敲出细胞内源性的该蛋白,通过表达构建载体在细胞表达EGFP与该蛋白的融合蛋白,达到精确定量测定信号强弱的目的。但是导师和其他人不同意,认为没有必要。我也就按照他们的意见来做,但我给导师明确说了保留我的意见。后来出了问题,信号果然很弱;增加几倍的激动剂,仍然很弱。但他们仍然认为敲出内源性蛋白没有必要。我很迷茫啊,请牛人给个建议。谢谢了先。

[ 来自科研家族 生物医药家族 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

独上高楼,望尽天涯路……
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keennes

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by chenliang_0513 at 2012-02-29 17:01:05:
本来就没有必要嘛,如果LZ看到那篇英文文献有报道请告知俺

真没必要?那如何实现精确定量啊?当然,定性就没必要那么费神了。
独上高楼,望尽天涯路……
5楼2012-02-29 17:30:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

320080920001

金虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
可以先检测一下内源蛋白的表达量的水平吧 如果太高的话就得考虑做knock-out了
2楼2012-02-28 16:51:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keennes

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 320080920001 at 2012-02-28 16:51:17:
可以先检测一下内源蛋白的表达量的水平吧 如果太高的话就得考虑做knock-out了

谢谢你。我也说过,把目前有的普通细胞,比如3t3,cho,cho-k1,u2os等做一个内源性蛋白RNA的QPCR,但是方案被否了。现在已经被停实验了,要求查文献,寻找更可行的办法。我真的很无奈……
独上高楼,望尽天涯路……
3楼2012-02-29 10:09:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenliang_0513

铁杆木虫 (职业作家)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
本来就没有必要嘛,如果LZ看到那篇英文文献有报道请告知俺
我本将心向明月,奈何明月照沟渠?
4楼2012-02-29 17:01:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 2rKfVQg2jQww 2026-11-06 5/250 2026-11-07 17:23 by Xc2FxHsHkBNc
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 4/200 2026-11-07 16:50 by Xc2FxHsHkBNc
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 4/200 2026-11-07 16:28 by Xc2FxHsHkBNc
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”:确已离世,正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 15/750 2026-11-06 13:49 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 12/600 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
信息提示
请填处理意见