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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 细菌逆转录引物
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cpshang

铜虫 (小有名气)

[求助] 细菌逆转录引物

大家好！自己目前想做细菌基因表达谱的分析，需要把mRNA逆转录后，再对cDNA进一步处理，由于自己刚入门，遇到很多棘手的问题：
1、total RNA 提取后，没必要除去其中的 tRNA 和 rRNA 吧？有两篇文献中说不除去，mRNA逆转录效果更好，不知是不是如此，和逆转录的引物是不是也有一定关系？
2、因为细菌是原核生物，mRNA没有PolyA 尾巴，逆转录应该用随机引物吧，看了好几篇文献，其中只提到用6~10个寡聚体随机引物组合来做，并没有提具体序列，是不是需要根据相应菌株的基因组特点来自己设计？
自己对这块不是太懂，希望大家给以帮助，或者给出相应的参考文献，谢谢！
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DowhatIshoulddowell！
1楼 2012-02-26 20:51:23
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li-spring

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 用试剂盒自带的随机引物就可以啦 2012-02-26 23:55:59
cpshang(金币+10): ★★★★★最佳答案 非常感谢！ 2012-03-03 15:06:02
你买CDNA第一链合成试剂盒里自带有随机引物的 我买了盒天根的 都有
赞一下 回复此楼
2楼2012-02-26 21:33:48
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