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cpshang

铜虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 218.7
散金: 9
红花: 3
帖子: 210
在线: 53.1小时
虫号: 1160953
注册: 2010-12-02
性别: GG
专业: 认知科学

[求助] 细菌逆转录引物

大家好！自己目前想做细菌基因表达谱的分析，需要把mRNA逆转录后，再对cDNA进一步处理，由于自己刚入门，遇到很多棘手的问题：
1、total RNA 提取后，没必要除去其中的 tRNA 和 rRNA 吧？有两篇文献中说不除去，mRNA逆转录效果更好，不知是不是如此，和逆转录的引物是不是也有一定关系？
2、因为细菌是原核生物，mRNA没有PolyA 尾巴，逆转录应该用随机引物吧，看了好几篇文献，其中只提到用6~10个寡聚体随机引物组合来做，并没有提具体序列，是不是需要根据相应菌株的基因组特点来自己设计？
自己对这块不是太懂，希望大家给以帮助，或者给出相应的参考文献，谢谢！

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DowhatIshoulddowell！

1楼 2012-02-26 20:51:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

li-spring

木虫 (著名写手)

应助: 4 (幼儿园)
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散金: 16
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虫号: 977934
注册: 2010-03-21
专业: 天然有机化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 用试剂盒自带的随机引物就可以啦 2012-02-26 23:55:59
cpshang(金币+10): ★★★★★最佳答案非常感谢！ 2012-03-03 15:06:02

你买CDNA第一链合成试剂盒里自带有随机引物的我买了盒天根的都有

2楼2012-02-26 21:33:48

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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