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cpshang

铜虫 (小有名气)

[求助] 细菌逆转录引物

大家好!自己目前想做细菌基因表达谱的分析,需要把mRNA逆转录后,再对cDNA进一步处理,由于自己刚入门,遇到很多棘手的问题:
1、total RNA 提取后,没必要除去其中的 tRNA 和 rRNA 吧?有两篇文献中说不除去,mRNA逆转录效果更好,不知是不是如此,和逆转录的引物是不是也有一定关系?
2、因为细菌是原核生物,mRNA没有PolyA 尾巴,逆转录应该用随机引物吧,看了好几篇文献,其中只提到用6~10个寡聚体随机引物组合来做,并没有提具体序列,是不是需要根据相应菌株的基因组特点来自己设计?
自己对这块不是太懂,希望大家给以帮助,或者给出相应的参考文献,谢谢!
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DowhatIshoulddowell!
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li-spring

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): 用试剂盒自带的随机引物就可以啦 2012-02-26 23:55:59
cpshang(金币+10): ★★★★★最佳答案 非常感谢! 2012-03-03 15:06:02
你买CDNA第一链合成试剂盒里自带有随机引物的 我买了盒天根的 都有
2楼2012-02-26 21:33:48
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