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细菌逆转录引物
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大家好！自己目前想做细菌基因表达谱的分析，需要把mRNA逆转录后，再对cDNA进一步处理，由于自己刚入门，遇到很多棘手的问题： 1、total RNA 提取后，没必要除去其中的 tRNA 和 rRNA 吧？有两篇文献中说不除去，mRNA逆转录效果更好，不知是不是如此，和逆转录的引物是不是也有一定关系？ 2、因为细菌是原核生物，mRNA没有PolyA 尾巴，逆转录应该用随机引物吧，看了好几篇文献，其中只提到用6~10个寡聚体随机引物组合来做，并没有提具体序列，是不是需要根据相应菌株的基因组特点来自己设计？ 自己对这块不是太懂，希望大家给以帮助，或者给出相应的参考文献，谢谢！ |
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li-spring
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2楼2012-02-26 21:33:48