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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 疏水层析蛋白洗不下来怎么办
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kycg

铜虫 (小有名气)

[求助] 疏水层析蛋白洗不下来怎么办

实验需要提纯蛋白，过离子交换层析后，接着过苯基-琼脂糖凝胶做疏水层析，用0.2M TRIS-HCL 1M硫酸铵ph=8.0缓冲液平衡后上样，用了0.2M TRIS-HCL，纯水洗脱都洗不完全，然后用0.5M的NAOH去洗，结果柱子上层还是有颜色，我的样品是淡黄色的，现在填料上的颜色也洗不掉。请教一下各位有没有什么洗脱的好方法。或者有什么方法能有效的减低疏水作用？谢谢！
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找片树叶把天遮住
1楼 2012-02-26 10:18:30
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kycg

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-02-27 23:13:42:
请阅读说明书

谢谢指导！
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找片树叶把天遮住
9楼2012-04-21 12:38:01
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
明天我帮你问问我的朋友啊
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2楼2012-02-26 23:15:16
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kingtsar

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
3楼2012-02-27 15:28:58
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
苯基疏水结合能力太强，是比较难洗脱，可以试下丁基、辛基、异丙基的疏水柱。再不行的话，可以试下用乙腈洗脱。
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关注我关注的
4楼2012-02-27 20:37:22
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