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kycg

铜虫 (小有名气)

[求助] 疏水层析蛋白洗不下来怎么办

实验需要提纯蛋白,过离子交换层析后,接着过苯基-琼脂糖凝胶做疏水层析,用0.2M TRIS-HCL 1M硫酸铵ph=8.0缓冲液平衡后上样,用了0.2M TRIS-HCL,纯水洗脱都洗不完全,然后用0.5M的NAOH去洗,结果柱子上层还是有颜色,我的样品是淡黄色的,现在填料上的颜色也洗不掉。请教一下各位有没有什么洗脱的好方法。或者有什么方法能有效的减低疏水作用?谢谢!
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找片树叶把天遮住
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的蛋白有辅基或辅酶吗,因为你说你的样品是有颜色的。如果有的话,可能是辅因子与柱子结合着,你蛋白早就洗脱掉了。
10楼2012-04-22 15:13:52
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