| 查看: 2716 | 回复: 0 | |||
xiaoping1986银虫 (著名写手)
|
[求助]
发色底物法检测方法
|
| 我在网上查了一下发色底物发检测的原理是，首先人工合成可以被待测凝血活酶催化裂解的化合物，且化合物连接上产色物质，在检测过程中产色物质可被解离下来，使被检样品中出现颜色变化，根据颜色变化可推算出被检凝血活酶的活性。产色物质一般选用连接对硝基苯胺（PNA）。游离的PNA呈黄色，其测定波长选用405nm。具体检测方法即可采用动态法、也可采用终点法。动态法即是连续记录样品的吸光度变化，算出单位时间吸光度的变化量，并以每分钟吸光度的变化来报告结果。终点法即是指在活性酶同产色物质作用一段时间后，加入乙酸终止反应，检测此段时间内吸光度的变化，进而推算出待检酶的活性。但是还是不太清楚操作的具体步骤是什么，比如怎样动态法中记录连续变化吸光度的变化时怎样记录数据，怎样计算结果的，有没有公式什么的？再有这种方法的标准曲线是怎样测定？比如文献中说加入0.1mL底物和酶37度下保温5min,在405nm下测定，底物有S-2288，S222等，请高手告知一下这个是怎样操作的，具体操作步骤是什么，非常感谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
【实验干货】生物超薄切片+HRTEM：线粒体嵴原子像一步到位
已经有0人回复
-
食品专业论文投稿请教
已经有0人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有215人回复
-
分享食品专业书籍《Fundamentals of Food Process Engineering》，以学习目的为主。
已经有2人回复
找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~
气相色谱检测方法问题，请教大家！！
已经有3人回复
- 底物上有两个醛基,只想还原其中一个成苄醇,有什么方法呢
已经有9人回复
- 【讨论】关于中间体的检测方法需要先做方法学验证吗
已经有12人回复
- 跪求除离子色谱外，甲酸的检测方法，越简便越好
已经有4人回复
- 请问用气相色谱法分离检测氨基酸用什么柱子？
已经有2人回复
- 【求助】氨气的气相色谱法检测方法
已经有3人回复
- 【求助/交流】【求助】细菌未知功能基因的克隆方法
已经有14人回复
- 【求助】有关 葵炔二醇的 检测方法
已经有10人回复
点击这里搜索更多相关资源科研从小木虫开始，人人为我，我为人人