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boymin2010

金虫 (正式写手)

[求助] 请教高手有关用琼脂糖电泳分离相差10bp左右的条带的方法

如题，我的电泳条件是4℃新鲜TBE电泳缓冲液/150min/2%胶/70V（~2.5伏每厘米）,但是分离效果很不明显。希望有做过此类电泳的高手不吝赐教！（目前无法做聚丙烯酰胺凝胶电泳）
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1楼 2012-02-22 21:06:31
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
琼脂糖电泳基本没法区分
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼2012-02-22 21:15:45
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
boymin2010(金币+4): ★有帮助 2012-02-23 10:40:50
用聚丙酰胺凝胶电泳，可以区分10 bp。
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3楼2012-02-22 23:53:14
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
小丹木木(金币+1): 鼓励回帖 2012-02-23 13:50:01
上一个回复贴没写完，错误操作发出去了

单靠琼脂糖很困难，2%理论上讲只能分辨到100 bp，不过你可以试试再提高胶浓度到3%，但很可能在高浓度下条带丢失。另外，以前看到过高分辨琼脂糖，可以分辨小片段DNA，楼主可以买点试试。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
4楼2012-02-22 23:59:59
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boymin2010

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by starseacow at 2012-02-22 23:59:59:
上一个回复贴没写完，错误操作发出去了

单靠琼脂糖很困难，2%理论上讲只能分辨到100 bp，不过你可以试试再提高胶浓度到3%，但很可能在高浓度下条带丢失。另外，以前看到过高分辨琼脂糖，可以分辨小片段 ...

嗯，昨天用了高分辨率的琼脂糖（超级贵），把胶的浓度提高到3%，勉强可以看得清。不知道还有什么改进办法吗？
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5楼2012-02-23 10:40:29
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