楼: Originally posted by whb21 at 2012-02-21 09:40:59:
个人感觉你酶切时间有点长，不知道你是否做了空载的空白对照

11楼: Originally posted by cxnde007 at 2012-02-21 10:36:23:
酶切时间长的话有什么影响呢？不是回切的更完全吗？

9楼: Originally posted by cxnde007 at 2012-02-21 10:29:22:
现在的问题是自连都长不出菌来，还有一个问题就是，我最开始转化涂板培养后，不论培养几天都没有菌长出来，后来就是实验组、对照组都在培养两三天才长出菌来，这是为什么呢？有的菌还能在含抗生素的培养基中要起 ...

10楼: Originally posted by cxnde007 at 2012-02-21 10:35:28:
哦，谢谢。感受态没问题，回收产物也测过了，很纯的，回收时也注意了让酒精挥发的问题。不知道卡那浓度一般应该是多少啊？我的卡那工作浓度是600mg/L,这个浓度是不是高呢？转化质粒时长的满满一板，可是自连就一 ...

楼: Originally posted by whb21 at 2012-02-21 15:17:12:
酶切反应时间不是越长越好，容易产生非特异性切割，

楼: Originally posted by fungixx at 2012-02-21 15:35:10:
’转化、涂板‘ 中间有没有37培养，所用的培养基是不加抗生素的。。。

楼: Originally posted by 凉亭 at 2012-02-21 15:37:47:
我觉得你的Kan浓度太高了吧 我刚才查了查自己用的 才10mg/L哎 其实自连的克隆长的少的话 是件好事 就是你转化的带有目的基因的质粒 效率很高嘛

9楼: Originally posted by cxnde007 at 2012-02-21 10:29:22:
现在的问题是自连都长不出菌来，还有一个问题就是，我最开始转化涂板培养后，不论培养几天都没有菌长出来，后来就是实验组、对照组都在培养两三天才长出菌来，这是为什么呢？有的菌还能在含抗生素的培养基中要起 ...

楼: Originally posted by fungixx at 2012-02-21 17:42:04:
对照组 加的什么？