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吴德光

禁虫 (小有名气)

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bosipopona

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
吴德光(金币+10): ★★★很有帮助 谢谢帮助 2012-02-22 14:50:05
用PCR扩增出来的不带A碱基的平末端的两段DNA片段能否直接用T4连接酶连接起来?
能,fermentas 的T4 ligase说明书上有,温度和时间同黏性末端连接时会有些不一样。
如果是带有A碱基的有尾末端的两段DNA片段能否通过T4连接酶补平后再连接起来?
可以。
第二、大连宝生物的solution 1连接酶能否连接平末端DNA?
这个具体忘了,网上下个说明书看看就行。我用过各种连接酶T4,solution I ,东洋纺的,个人以为不管用哪一种,主要连接时间够了其实差不多,关键在于连接之前的工作和连接体系中质粒和DNA的摩尔比要合适。
bosipopona
2楼2012-02-21 12:02:25
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ytetyio09

新虫 (正式写手)

可以试试这篇论文的方法,虽然是个小的改进,但是值得一试,而且很方便:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24613256
3楼2014-03-25 10:01:31
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