| 查看: 2604 | 回复: 2 | ||
[求助]
PITC衍生化测定氨基酸
|
|
用PITC衍生化测定甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺的含量 测定步骤： 1. 用纯水配制甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺的混合液，其浓度都大约为0.05mg/mL，得到甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺的混合标准溶液。 2. 配制1.2%PITC乙腈溶液和14%TEA乙腈溶液。 3. 衍生化过程：取200uL氨基酸混合标准溶液于1.5mL离心管中，然后加入100uL1.2%PITC乙腈溶液和100uL14%TEA乙腈溶液，摇震使其混合均匀，然后于水浴锅中水浴加热1小时，然后加入500uL正己烷萃取两次，最后取下层液200uL于HPLC瓶中,然后再加入400uL水稀释，用HPLC分析。 色谱条件： 柱子：Agilent SB-Aq 250mm*4.6mm, 5um 流动相A：50mM NaAC (pH=6.5) 流动相B：50mM NaAC (pH=6.5):ACN=1:1 Time:0-10-25-40min B%:5%-5%-95%-95% 进样量10uL 出现问题： 1. 甘氨酸和谷氨酰胺衍生化峰会分叉。 2. 会出现很多杂峰，尤其是在强洗脱部分。 请有经验的虫友们多多帮助我！谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
存款400万可以在学校里躺平吗
已经有5人回复
-
拟解决的关键科学问题还要不要写
已经有5人回复
-
基金委咋了？2026年的指南还没有出来？
已经有9人回复
-
基金申报
已经有5人回复
-
国自然申请面上模板最新2026版出了吗？
已经有17人回复
-
纳米粒子粒径的测量
已经有8人回复
-
疑惑？
已经有5人回复
-
计算机、0854电子信息（085401-058412）调剂
已经有5人回复
-
Materials Today Chemistry审稿周期
已经有5人回复
-
溴的反应液脱色
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 哪位大哥会做氨基酸衍生化，求指教啊！！！
已经有7人回复
- 柱前AQC衍生HPLC-PAD测氨基酸，两个峰分不开？求助求助！
已经有8人回复
- 氨基酸纯品除酸的方法？？？
已经有5人回复
- 氨基酸衍生剂的选择
已经有5人回复
- 液相色谱分析氨基酸的衍生方法
已经有10人回复
- 首次使用液质联用问题请教
已经有3人回复
- 氨基酸及其衍生物的硅胶正向柱分离
已经有17人回复
- 氨基酸自动分析仪和柱前衍生高效液相测氨基酸的一些问题
已经有8人回复
- 第一次做柱前衍生化反应
已经有5人回复
- HPLC柱前衍生测定氨基酸含量标准品出现两个高度相关峰
已经有43人回复
- 如何确定氨基酸衍生检测VWD检测器的波长转换时间？
已经有9人回复
- L-天冬氨酸（L-Asp）柱前衍生用于高效液相色谱检测
已经有11人回复
- 我的样品是否需要衍生化
已经有5人回复
- PITC即edman法测肽链氮端氨基酸
已经有3人回复
- 【求助】FMOC柱前衍生化
已经有5人回复
- 【求助】最近在做氨基酸的衍生，请问薄层中氨基酸显色的茚三酮溶液是怎么配制的？
已经有6人回复
- 【求助】求助：请问自动进样器怎么自动完成OPA-FMOC衍生化方法分析氨基酸？
已经有11人回复
- 【求助】关于液相测氨基酸的问题
已经有11人回复
- 【求助】求助：液相峰分离效果不好？怎么回事？
已经有4人回复
- 【求助】液相柱堵了怎么办
已经有21人回复
- 【求助】氨基酸含量测定
已经有13人回复
2楼2012-01-31 17:49:52
3楼2013-07-10 12:42:12