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yoyoyoyo3985

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[交流] 染色剂的浓度对DNA电泳亮度有多大影响已有2人参与

我最近在做克隆，整天pcr，酶切回收，连接的工作。一直是根据电泳亮度来判断DNA片段的浓度，可是发现，同样的东西，酶切前加2ul做浓度检测的亮度和酶切了40ul后跑电泳的亮度居然差不多，难道是因为染色剂的多少带来这种差异？

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1楼 2012-01-19 07:26:17

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yoyoyoyo3985

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引用回帖:

楼: Originally posted by shuishui007 at 2012-01-19 09:49:04:
染色剂对目标DNA片段的影响和对Marker的影响是一致的。目标DNA的浓度是根据其与Marker相对亮度来确定的，因此染色剂的差异对浓度检测没有太大作用的。回收效率因目标片段的长度、方法和个人操作等原因可能差异较大 ...

谢谢，因为我们实验室染色剂不是加在胶里，而且marker和loading buffer里面的染色剂没有一致，所以我担心有影响，我回头讲染色剂浓度调成一样再试试