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qiuniao

铜虫 (小有名气)

[求助] HPLC 缓冲盐平衡时 基线波动

由于A相为醋酸钠缓冲液 D相为60%乙腈 所以做完样品之后  把A换为水 D换为纯乙腈就用90%水 冲了1个小时 随后变为 60%水 40%水 10%水 纯乙腈  最后封柱子
但是今天做时  先用D相平衡 没问题 但是用A相平衡时柱压一开始猛增到180bar 这我能理解 随后又下降到169bar 然后没几分钟 又开始缓慢上升 估计有4分钟了 上升到175bar 也没有稳定的意思
肿么办
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foxling2

铜虫 (小有名气)

要看你的盐浓度是多少?如果太高的话,我估计是缓慢析出导致。怎么判断是不是这个原因呢?你可以按照比例将二者混合均匀后放置一段时间,然后用微孔滤膜滤过,就知道是不是了
yyh
9楼2012-02-18 20:34:23
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wqs43

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
qiuniao(金币+4): ★★★很有帮助 2012-01-14 17:37:12
醋酸钠在乙腈中溶解度很小,因此楼主这样换来换取醋酸钠溶液和乙腈的比例,肯定有醋酸钠在乙腈中析出,从而柱压升高。建议楼主用98:2的水/甲醇冲洗,使盐全部溶剂流出,在换用乙腈冲洗。这样柱压肯定会下来的。
2楼2012-01-14 16:12:07
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
qiuniao(金币+4): ★★★很有帮助 2012-01-14 17:37:20
流动相平衡过程中,因流动相组分变化而粘度变化,而造成压力波动,是正常现象。平衡一段时间就好了。
另外流动相存在气泡也会造成压力波动,超声一下就好了。

若非上述原因。
管路因长期使用缓冲盐溶液,而逐渐有盐析出,也会造成压力波动。把那些单向阀密封圈之类的卸下了异丙醇超声清洗就可以了。另外,管路也可使用90%水清洗1h再改用异丙醇清洗。
守候在风中的宁静。
3楼2012-01-14 16:27:09
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qiuniao

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by wqs43 at 2012-01-14 16:12:07:
醋酸钠在乙腈中溶解度很小,因此楼主这样换来换取醋酸钠溶液和乙腈的比例,肯定有醋酸钠在乙腈中析出,从而柱压升高。建议楼主用98:2的水/甲醇冲洗,使盐全部溶剂流出,在换用乙腈冲洗。这样柱压肯定会下来的。

换来换取醋酸钠溶液和乙腈的比例?
因为我的流动相是用乙腈
您的意思是做完之后 再换成甲醇? 调甲醇水的比例冲 然后再换回乙腈?
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4楼2012-01-14 18:27:24
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