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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC 缓冲盐平衡时 基线波动
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qiuniao

铜虫 (小有名气)

[求助] HPLC 缓冲盐平衡时 基线波动

由于A相为醋酸钠缓冲液 D相为60%乙腈 所以做完样品之后  把A换为水 D换为纯乙腈就用90%水 冲了1个小时 随后变为 60%水 40%水 10%水 纯乙腈  最后封柱子
但是今天做时  先用D相平衡 没问题 但是用A相平衡时柱压一开始猛增到180bar 这我能理解 随后又下降到169bar 然后没几分钟 又开始缓慢上升 估计有4分钟了 上升到175bar 也没有稳定的意思
肿么办
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不要为旧的悲伤浪费新的眼泪
1楼 2012-01-14 15:04:25
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wqs43

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by qiuniao at 2012-01-14 18:27:24:
换来换取醋酸钠溶液和乙腈的比例？
因为我的流动相是用乙腈
您的意思是做完之后 再换成甲醇？ 调甲醇水的比例冲 然后再换回乙腈？

你是做完关机吧？如果昨晚关机，哪就可以直接用甲醇水冲洗后再直接用甲醇冲洗，能后关机。换回乙腈，是让你试试盐有没有冲洗干净，没别的意思。
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5楼2012-01-14 18:35:24
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wqs43

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
qiuniao(金币+4): ★★★很有帮助 2012-01-14 17:37:12
醋酸钠在乙腈中溶解度很小，因此楼主这样换来换取醋酸钠溶液和乙腈的比例，肯定有醋酸钠在乙腈中析出，从而柱压升高。建议楼主用98：2的水/甲醇冲洗，使盐全部溶剂流出，在换用乙腈冲洗。这样柱压肯定会下来的。
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2楼2012-01-14 16:12:07
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
qiuniao(金币+4): ★★★很有帮助 2012-01-14 17:37:20
流动相平衡过程中，因流动相组分变化而粘度变化，而造成压力波动，是正常现象。平衡一段时间就好了。
另外流动相存在气泡也会造成压力波动，超声一下就好了。

若非上述原因。
管路因长期使用缓冲盐溶液，而逐渐有盐析出，也会造成压力波动。把那些单向阀密封圈之类的卸下了异丙醇超声清洗就可以了。另外，管路也可使用90%水清洗1h再改用异丙醇清洗。
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守候在风中的宁静。
3楼2012-01-14 16:27:09
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qiuniao

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by wqs43 at 2012-01-14 16:12:07:
醋酸钠在乙腈中溶解度很小，因此楼主这样换来换取醋酸钠溶液和乙腈的比例，肯定有醋酸钠在乙腈中析出，从而柱压升高。建议楼主用98：2的水/甲醇冲洗，使盐全部溶剂流出，在换用乙腈冲洗。这样柱压肯定会下来的。

换来换取醋酸钠溶液和乙腈的比例？
因为我的流动相是用乙腈
您的意思是做完之后 再换成甲醇？ 调甲醇水的比例冲 然后再换回乙腈？
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不要为旧的悲伤浪费新的眼泪
4楼2012-01-14 18:27:24
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