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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 电转化电击时间短，才2ms~什么原因？？？5555555555555
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匿名

用户注销 (小有名气)
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1楼 2012-01-13 22:03:12
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紫色的风

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by lmxu0917 at 2012-01-31 17:39:29
由于建库的原因我做了好长一段时间的电转化主要技术点为以下几方面：
1、绝对干净，是指所用的试剂一定要用纯水配制（millipore）,摇菌用的大瓶用浓酸（细胞培养时候处理玻璃器皿的浓酸）浸泡过夜，冲洗干净后用纯 ...

你好，看到分享的电转化protocol，我打算实验一下，之前得到的感受态转化效率只有10的8次方，另外，想请教几个问题：
制备感受态时，摇菌体积是多少，制备得到多少感受态细胞？
感受态细胞在多大浓度的高邮中保存，保存多久时间内会保持其转化效率？

谢谢！
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12楼2014-10-30 11:05:46
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): 依然热心啊！ 2012-01-14 10:24:53
wickhamhan(金币+2): ★有帮助 热心鼓励！ 2012-01-14 10:33:33
呵呵，如果不是用来建文库之类的需要大量克隆的工作，还是用化转来取代电转的好。化转虽然转化率没有电转高，但是稳定性和对感受态质量要求比电转要好很多。

祝 试验顺利
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
3楼2012-01-14 10:12:56
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2012-01-15 11:36:50
wickhamhan(金币+2): 2012-02-01 20:59:53
DNA用的无菌水（含10% elution buffer）洗脱的.
不要使用elution buffer.单纯用无菌dd水去洗脱，祝顺利！
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4楼2012-01-14 14:21:18
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huiee

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): 欢迎常来哦 2012-01-15 11:36:58
wickhamhan(金币+2): 2012-02-01 21:00:00
都改成纯水洗脱  一般菌洗两次就OK
DNA一定要融到纯水里，or 含盐 严重会爆杯
还是电转效率高
而且 您是转的啥质粒 还是链接产物？
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5楼2012-01-14 17:31:45
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