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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

[求助] 胞内酶酶活的测定

大家好,我想请教一下胞内酶,怎么测酶活,我的酶是霉菌。该怎样使胞内的酶释放出来?都有哪些方法呢?谢谢大家!
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只要努力,总会有结果的
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tinylu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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主要看你测什么酶了,不同的酶需要不同的测定方法,可以用超声波,研磨,使用有机溶剂等破碎细胞壁使胞内酶释放出来再进行测定,建议你多找点资料看下。
2楼2012-01-13 20:47:37
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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by tinylu at 2012-01-13 20:47:37:
主要看你测什么酶了,不同的酶需要不同的测定方法,可以用超声波,研磨,使用有机溶剂等破碎细胞壁使胞内酶释放出来再进行测定,建议你多找点资料看下。

我主要测的是脂肪酶,今天我用超声波超声了一下。我的步骤是:超声功率在200W下,冰水浴超声15分钟,超5秒,停5秒。我的菌是经过离心,倒掉上清液,菌体中加入用PH=7.5的磷酸缓冲液,放在超声波中超声。超15min后4℃下冷冻离心。取上清液,测酶活。我不知道这个方法对不?
只要努力,总会有结果的
3楼2012-01-14 20:46:16
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