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金虫 (小有名气)

[求助] 胞内酶酶活的测定

大家好，我想请教一下胞内酶，怎么测酶活，我的酶是霉菌。该怎样使胞内的酶释放出来？都有哪些方法呢？谢谢大家！

只要努力，总会有结果的

1楼 2012-01-12 20:28:36

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木虫 (正式写手)

感谢参与，应助指数 +1

主要看你测什么酶了，不同的酶需要不同的测定方法，可以用超声波，研磨，使用有机溶剂等破碎细胞壁使胞内酶释放出来再进行测定，建议你多找点资料看下。

2楼2012-01-13 20:47:37

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金虫 (小有名气)

引用回帖:

楼: Originally posted by tinylu at 2012-01-13 20:47:37:
主要看你测什么酶了，不同的酶需要不同的测定方法，可以用超声波，研磨，使用有机溶剂等破碎细胞壁使胞内酶释放出来再进行测定，建议你多找点资料看下。

我主要测的是脂肪酶，今天我用超声波超声了一下。我的步骤是：超声功率在200W下，冰水浴超声15分钟，超5秒，停5秒。我的菌是经过离心，倒掉上清液，菌体中加入用PH=7.5的磷酸缓冲液，放在超声波中超声。超15min后4℃下冷冻离心。取上清液，测酶活。我不知道这个方法对不？

只要努力，总会有结果的

3楼2012-01-14 20:46:16

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