24小时热门版块排行榜    

查看: 2049  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

隔夜凉白开

新虫 (小有名气)

[求助] 除了利用同源性做PCR外,如何定向筛选一个基因?

我目前在做一个菌株中纤维素酶的扩增分析,原定方案是简单的利用其他已知纤维素酶的同源性设计引物把我要的目的基因P出来,但是可能因为我实验的菌株同源性差,一直是阴性实验结果。现在想向各位高手请教下,还有什么别的较为简便的方法能筛选扩增出一个基因?时间比较紧迫。我还设想过用基因陷阱,但是这能定向筛出目的基因吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

隔夜凉白开

新虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 海阔天空8158 at 2012-01-14 16:56:03:
实际上,就是单纯的利用同源性的方法,也不一定行不通的。
首先,使用几种进化上比较接近的几个种属目的蛋白进行blast,找到比较保守的氨基酸序列,然后合成简并引物。电泳后,切下条带测序。如果能够得到一些目 ...

非常感谢您的建议,我现在已经在用 icodehop strategy设计简并引物了。
4楼2012-03-07 17:31:22
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

隔夜凉白开

新虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by guojianping at 2012-01-16 20:44:27:
为什么不试着换换PCR条件退火温度之类

已经做过梯度了,但是一直是阴性。
5楼2012-03-07 17:32:14
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 隔夜凉白开 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
请填处理意见