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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于感受态制备问题请教
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landscape37

新虫 (小有名气)

[求助] 关于感受态制备问题请教

用氯化钙法制备感受态中，离心菌液得到的菌体都有一块黑黑的，不知道怎么回事啊，有谁有过这样的问题吗，然后用氯化钙重悬也不太好溶，还要接着做吗，是不是已经废了
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1楼 2012-01-08 08:44:20
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凤凰城边

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 有道理 2012-01-08 21:03:58
离心速率台大的原因吧，菌液不能太浓，离心速率5000g每分钟就ok就可以
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爱拼才会赢
10楼2012-01-08 20:41:39
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lihengyang86

铜虫 (小有名气)
★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2012-01-08 13:46:58
是刚一开始离心就出现黑色的菌块儿吗？！我们这几天做了一批感受态细胞，从没有出现过你说的这种情况啊！是不是LB培养基不干净啊？！
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2楼2012-01-08 11:03:29
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rtt0325

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+5): 感谢新朋友积极帮助他人，高额奖励@！ 2012-01-08 13:46:44
黑色的可能是杂质吧，我们没碰到过……氯化钙重悬的很难的话，你是不是离心离的速度大了或者时间长了？不过我们重悬的时候以前都在冰水里摇半天，后面实在烦了，就直接用枪吹吸的……但是要轻要慢。
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3楼2012-01-08 11:14:44
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wanhscn(金币+2): 辛苦！ 2012-01-08 13:47:12
landscape37(金币+10): ★★★★★最佳答案 2012-01-14 04:13:14
见过，好像菌量太大就会呈黑色。但是打匀之后就没有黑色了，而且往下做没有问题。
做感受态，书上是说不能用枪吹打，但那菌体离心之后很难靠摇晃来重悬，所以我们一般都是在冰上用枪轻轻吹打混匀的。
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4楼2012-01-08 11:31:11
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