| 查看: 2288 | 回复: 14 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
提RNA反转录后，用GAPDH和TLR进行PCR，可是GAPDH条带很亮，TLR怎么都出不来
|
||
|
各位大侠，我最近提了RAW264.7细胞的RNA，反转录后，用GAPDH和TLR进行PCR，可是GAPDH条带很亮，TLR怎么都出不来。 第一次加了6微升DEPC水溶解RNA，然后取5微升RNA溶液作RT-PCR（20微升体系），再分别用GAPDH和TLR2进行PCR。 图见1 第二次取500ng 小鼠肺组织、RAW264.7细胞的总RNA，进行逆转，用的是M-MLV的酶，按照protocol上的10微升体系，在用TLR1和GAPDH进行PCR。结果还是只有很亮的GAPDH，不过两次PCR都有很多引物二聚体。 见图2 谁能告诉我这到底是为什么呀~~~  1 MARKER 1RAW(GAPDH tlr2) 2RAW(GAPDH tlr2)  2 MARKER TLR1(肺 1RAW 2RAW) GAPDH(肺 1RAW 2RAW).jpg |
回复此楼» 本帖@通知
» 猜你喜欢
求，培养细胞对糖皮质类激素耐受能力检测的实验方法有哪些
已经有1人回复
-
请问有五氯化铁这个化学物吗？
已经有0人回复
-
地方病学/职业病学论文润色/翻译怎么收费?
已经有143人回复
-
公派出国 芝加哥大学 求租房信息 可合租 女
已经有3人回复
-
国际合作查询问题
已经有2人回复
lihegang2000
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 6452.8
- 散金: 300
- 红花: 4
- 帖子: 631
- 在线: 377.6小时
- 虫号: 311541
- 注册: 2006-12-30
- 性别: GG
- 专业: 免疫遗传学
12楼2012-01-10 11:04:05
lihegang2000
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 6452.8
- 散金: 300
- 红花: 4
- 帖子: 631
- 在线: 377.6小时
- 虫号: 311541
- 注册: 2006-12-30
- 性别: GG
- 专业: 免疫遗传学
2楼2012-01-08 09:36:37
3楼2012-01-08 10:23:36
4楼2012-01-08 10:59:05
130