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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 过大孔树脂柱时，试剂过渡的问题？
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jane-zh

金虫 (小有名气)

[求助] 过大孔树脂柱时，试剂过渡的问题？

请问各位前辈，我现在过大孔树脂柱，除糖以富集黄酮，上样后用10倍体积的蒸馏水冲柱（糖应该大部分都冲掉了吧？），然后直接用100%的甲醇冲，收集甲醇液浓缩，结果树脂柱中出现大量气泡（这也算是正常吧，据说只是影响流速），关键是收集的甲醇液出现浑浊，不同的样品浑浊程度也有差异，求解释？？？谢谢
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1楼 2012-01-02 17:56:43
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jane-zh

金虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by 亦心百合 at 2012-01-03 09:42:28:
因为大孔树脂的上柱顺序是从极性由大到小，洗脱溶剂一般依次为水、10%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、90乙醇等。然后再依照实际情况上其他柱进行继续分离过程。醇水梯度变化太大会产生大量气泡。树脂预处理不好 ...

谢谢，我过柱子主要是为了除糖，不细分黄酮，得到总黄酮就行，也得这样一点一点加梯度吗？然后收集所有梯度的洗脱液合并浓缩？
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7楼2012-01-03 10:17:43
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zhonghualt

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥(金币+1): 谢谢参与交流~~~ 2012-01-03 08:13:05
树脂出现大量气泡是因为溶剂梯度变化太大，树脂溶胀不同导致，还可能会断层，如果坚决用这样的溶剂洗也没办法；出现浑浊我认为可能是树脂没处理干净，还有其本身的有机溶剂残留，可以闻闻有没有有机味~~~
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2楼2012-01-02 21:51:26
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coffee57165

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥(金币+1): 谢谢参与交流~~~ 2012-01-03 08:13:11
梯度太大了！！就算你在烧杯中把纯甲醇与水 混合 都会产生气泡的 大孔是否为新的？预处理了没？还可能 棉花没塞好
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3楼2012-01-02 22:32:00
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jane-zh

金虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by coffee57165 at 2012-01-02 22:32:00:
梯度太大了！！就算你在烧杯中把纯甲醇与水 混合 都会产生气泡的 大孔是否为新的？预处理了没？还可能 棉花没塞好

树脂用乙醇泡了24小时，之后洗至无醇味，然后酸碱处理了，（但不是上完每个样之后都再生处理，因为是一根小柱，1.5*30cm,所以我上完两个样之后再生处理一次；），上柱又用水冲洗了5BV,之后上样，用水冲。请问上样之前必须先用甲醇冲洗吗？
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4楼2012-01-03 09:36:05
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