24小时热门版块排行榜    

查看: 2566  |  回复: 9

jane-zh

金虫 (小有名气)

[求助] 过大孔树脂柱时,试剂过渡的问题?

请问各位前辈,我现在过大孔树脂柱,除糖以富集黄酮,上样后用10倍体积的蒸馏水冲柱(糖应该大部分都冲掉了吧?),然后直接用100%的甲醇冲,收集甲醇液浓缩,结果树脂柱中出现大量气泡(这也算是正常吧,据说只是影响流速),关键是收集的甲醇液出现浑浊,不同的样品浑浊程度也有差异,求解释???谢谢
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

药分、天药资料收藏 好贴

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有2个 )

jane-zh

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by coffee57165 at 2012-01-02 22:32:00:
梯度太大了!!就算你在烧杯中把纯甲醇与水 混合 都会产生气泡的 大孔是否为新的?预处理了没?还可能 棉花没塞好

树脂用乙醇泡了24小时,之后洗至无醇味,然后酸碱处理了,(但不是上完每个样之后都再生处理,因为是一根小柱,1.5*30cm,所以我上完两个样之后再生处理一次;),上柱又用水冲洗了5BV,之后上样,用水冲。请问上样之前必须先用甲醇冲洗吗?
4楼2012-01-03 09:36:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jane-zh

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 亦心百合 at 2012-01-03 09:42:28:
因为大孔树脂的上柱顺序是从极性由大到小,洗脱溶剂一般依次为水、10%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、90乙醇等。然后再依照实际情况上其他柱进行继续分离过程。醇水梯度变化太大会产生大量气泡。树脂预处理不好 ...

谢谢,我过柱子主要是为了除糖,不细分黄酮,得到总黄酮就行,也得这样一点一点加梯度吗?然后收集所有梯度的洗脱液合并浓缩?
7楼2012-01-03 10:17:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

zhonghualt

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
豆哥(金币+1): 谢谢参与交流~~~ 2012-01-03 08:13:05
树脂出现大量气泡是因为溶剂梯度变化太大,树脂溶胀不同导致,还可能会断层,如果坚决用这样的溶剂洗也没办法;出现浑浊我认为可能是树脂没处理干净,还有其本身的有机溶剂残留,可以闻闻有没有有机味~~~
2楼2012-01-02 21:51:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

coffee57165

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
豆哥(金币+1): 谢谢参与交流~~~ 2012-01-03 08:13:11
梯度太大了!!就算你在烧杯中把纯甲醇与水 混合 都会产生气泡的 大孔是否为新的?预处理了没?还可能 棉花没塞好
3楼2012-01-02 22:32:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jane-zh

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by zhonghualt at 2012-01-02 21:51:26:
树脂出现大量气泡是因为溶剂梯度变化太大,树脂溶胀不同导致,还可能会断层,如果坚决用这样的溶剂洗也没办法;出现浑浊我认为可能是树脂没处理干净,还有其本身的有机溶剂残留,可以闻闻有没有有机味~~~

树脂用乙醇泡了24小时,之后洗至无醇味,上柱又用水冲洗了5BV,之后上样的啊?那这样得到甲醇部分,浓缩定容后,0.22的微孔滤膜能除去浑浊杂质吗?
5楼2012-01-03 09:39:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

亦心百合

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
qinhy(金币+1): 多谢参与交流~ 2012-01-03 19:47:02
jane-zh: 金币+2 2012-04-11 18:39:00
因为大孔树脂的上柱顺序是从极性由大到小,洗脱溶剂一般依次为水、10%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、90乙醇等。然后再依照实际情况上其他柱进行继续分离过程。醇水梯度变化太大会产生大量气泡。树脂预处理不好时会产生浑浊。
6楼2012-01-03 09:42:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhonghualt

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jane-zh at 2012-01-03 09:39:06:
树脂用乙醇泡了24小时,之后洗至无醇味,上柱又用水冲洗了5BV,之后上样的啊?那这样得到甲醇部分,浓缩定容后,0.22的微孔滤膜能除去浑浊杂质吗?

泡完之后应该先用95%乙醇洗至无有机味,可以在流出的液体中加5倍量的蒸馏水,直到不出现浑浊,然后再用水洗至没有醇味。微孔滤膜只能除去0.22以上的较大分子,应该除不去,但也可以试试~~~
8楼2012-01-03 18:01:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

亦心百合

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by jane-zh at 2012-01-03 10:17:43:
谢谢,我过柱子主要是为了除糖,不细分黄酮,得到总黄酮就行,也得这样一点一点加梯度吗?然后收集所有梯度的洗脱液合并浓缩?

分离总黄酮时,先用水洗掉多糖,再用70%左右的乙醇洗脱就可以了
9楼2012-01-05 08:24:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一个人-旅行

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
干嘛用极性那么强的甲醇,而且还是纯甲醇。如果你想稳妥点的话,可以采用乙醇梯度洗提:20%、40%、60%、80%进行洗脱,收集不同浓度的洗脱液。
10楼2012-03-18 19:08:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jane-zh 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-18 6/300 2026-03-22 20:18 by edmund7
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +5  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 7/350 2026-03-22 19:44 by 公瑾逍遥
[考研] 306求调剂 +6 chuanzhu川烛 2026-03-18 6/300 2026-03-22 19:39 by 公瑾逍遥
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-20 3/150 2026-03-22 16:00 by ColorlessPI
[考研] 305分求调剂(食品工程) +4 Sxy112 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:26 by 无懈可击111
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +3 niko- 2026-03-22 3/150 2026-03-22 15:15 by 杨杨杨紫
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +3 酥酥鱼.. 2026-03-21 3/150 2026-03-22 11:31 by 杨杨杨紫
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +8 .6lL 2026-03-18 8/400 2026-03-21 00:58 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
信息提示
请填处理意见