18楼: Originally posted by 393658000 at 2012-01-07 09:22:42:
你算过你切下的2个片段的分子量比么？你根据你质粒的总浓度算一下看你的93bp应该是多少浓度，一般你看你购买的Marker最亮的是30ng/微升（以前用的什么公司的是这样 具体哪个公司忘记了），你酶切完去跑胶不是全都 ...

20楼: Originally posted by faile18 at 2012-01-10 06:11:26:
预实验做的15微升体系的小量酶切，全部都点样了，这个区段双酶切的问题已经解决了，大量酶切回收背景可以明显的看到切下来的两条带。但另一个区段的双酶切，切下来96bp的片段我始终没有观察到，可能是相比较于十 ...

21楼: Originally posted by faile18 at 2012-01-10 06:17:29:
感谢您的回复。确实是我没有算过他们之间的比例是多大，或许我15微升的小量酶切体系，确实不足以观察到这条小带，但我是想找个办法，在小量酶切体系中观察到这条带，要不然我没办法确定这个双酶切是否成功。谢谢

22楼: Originally posted by zehego at 2012-01-11 10:11:26:
MetaPhor我没做过，你可以试试。我觉得你看不到的问题主要是这个条带的DNA浓度不够；跑胶不能跑太长时间，以防跑出胶。

23楼: Originally posted by diy患者 at 2012-01-11 22:28:05:
buffer居然对酶的性能影响这么大，有点出乎我的意料，星活性导致？

内容我没有太看明白。我就光说说，不同构象速度吧。

07%-1.5%的胶中，由快到慢，以此是超螺旋，线状，解螺旋。其中，线状和解螺旋靠的很近 ...