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huichong

铁虫 (初入文坛)

[求助] 我的pcr产物怎么跟瀑布一样,究竟是为什么

大家帮忙看看,我p的是老师原来pcr的产物,大概9kb,我拿这做模板,怎么p出来是这样子的啊,究竟什么原因啊,
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fwks

铁杆木虫 (小有名气)


小丹木木(金币+1): 很有道理啊 2012-01-11 13:38:29
引用回帖:
31楼: Originally posted by huichong at 2012-01-08 00:04:14:
程序是95度——3min
95度30s;56度30s;72度6min;——35cycles
72度10min
4度。。。

你要扩增的条带是9kb,延伸时间才6min,有点短啊。建议你把延伸时间改到10min以上试试。
而且扩增这么长的片段,要用到专门的扩增长片段的酶,你用的哪家公司的?有时候如果长片段中GC含量偏高,PCR体系中还需要加其他的辅助试剂。
32楼2012-01-08 10:02:35
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heroyl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没图片啊楼主!!
实验虐我千百遍,我待实验如初恋
2楼2011-12-27 16:43:55
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amylose108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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小丹木木(金币+1): 鼓励应助哦 2012-01-04 08:48:30
我也做过很多这样的PCR,我分析多半是由于引物不好造成的,但如果你能把DNA摸板弄的够纯质量高的话,也可避免
4楼2011-12-27 21:36:52
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huichong

铁虫 (初入文坛)

西瓜: 回帖置顶 2011-12-28 13:12:32
诶。。。额明明传图了。怎没了?现穿上。。。

左右都是maker

5楼2011-12-28 01:25:48
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