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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助！！】关于蛋白质 肽谱~~~~~~~~大家帮忙啊！！
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zyfly

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助！！】关于蛋白质 肽谱~~~~~~~~大家帮忙啊！！

现在的样品就是粗蛋白，检测方法就是定氮法，但是被说检测方法不具有专属性，建议做肽谱研究。
       查了一些资料，肽谱是蛋白质鉴定的手段，用于这种粗蛋白的鉴定可行吗？？
如果可行，有没有人能给提供个大体的试验思路？？？？？
        先行谢过啊~~~~~~~~~~~~！！！
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1楼 2011-12-23 09:17:10
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daodao8657

金虫 (小有名气)
★
amisking(金币+1): 鼓励积极应助！ 2011-12-23 18:03:48
肽谱也是需要纯化后的蛋白，粗蛋白在检测时会有很多的杂峰干扰，不能确定哪个是目的蛋白的特征峰，所以无法检测
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2楼2011-12-23 11:03:21
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zyfly

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by daodao8657 at 2011-12-23 11:03:21:
肽谱也是需要纯化后的蛋白，粗蛋白在检测时会有很多的杂峰干扰，不能确定哪个是目的蛋白的特征峰，所以无法检测

我也觉得无法检测，现在的样品就是粗蛋白，也没有确定的特征蛋白，如果要从头开始筛选，那是不是要很繁琐也需要很长时间？？？
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3楼2011-12-24 09:13:21
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zhizhuo616

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不太清楚你主要目的？是要蛋白定量还是定性？
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4楼2011-12-24 18:15:12
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daodao8657

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zyfly at 2011-12-24 09:13:21:
我也觉得无法检测，现在的样品就是粗蛋白，也没有确定的特征蛋白，如果要从头开始筛选，那是不是要很繁琐也需要很长时间？？？

蛋白的性质和在物种中的表达量都不同，有些蛋白很繁琐，也有很多蛋白很容易，要做肽谱的话不需要纯度95%以上，只要在SDS-PAGE上能和其他杂蛋白分开即可
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5楼2011-12-26 10:28:22
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zyfly

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by zhizhuo616 at 2011-12-24 18:15:12:
不太清楚你主要目的？是要蛋白定量还是定性？

是要定性，但是现在我的样品就是从贝类中提取的粗蛋白，要定性的话不是要把粗蛋白再分，纯化，才能进行肽谱？？？
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6楼2011-12-26 11:59:22
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zyfly

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by daodao8657 at 2011-12-26 10:28:22:
蛋白的性质和在物种中的表达量都不同，有些蛋白很繁琐，也有很多蛋白很容易，要做肽谱的话不需要纯度95%以上，只要在SDS-PAGE上能和其他杂蛋白分开即可

我的意思是，现在这种粗蛋白，可能含成百上千的蛋白，如果要通过肽谱定性，难道真的要把蛋白全做？？？
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7楼2011-12-26 12:03:12
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daodao8657

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zyfly at 2011-12-26 12:03:12:
我的意思是，现在这种粗蛋白，可能含成百上千的蛋白，如果要通过肽谱定性，难道真的要把蛋白全做？？？

把蛋白全做不现实，可以先经过简单的分离后，确定了目的条带即可，只是部分纯化
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8楼2011-12-26 13:03:05
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