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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 胡萝卜素液相条件：安捷伦1260反相C18色谱柱
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wjydyky

新虫 (初入文坛)

[求助] 胡萝卜素液相条件：安捷伦1260反相C18色谱柱

用液相分离胡萝卜素，流动相为甲醇：乙腈=64:36，等度洗脱，第一次能很好的分离，但重复进样后就没有峰出现，样品和标准品均用丙酮溶解。出峰时间是否与溶剂有关系呢？洗柱子是用95%的甲醇洗30min，现在重复性一直没有做出来，而且每次的出峰时间也有差别，求高手解答！！！！！！
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1楼 2011-12-12 12:56:18
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foxling2

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你用丙酮溶解肯定做不出来
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yyh
2楼2011-12-12 21:00:32
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wjydyky

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by foxling2 at 2011-12-12 21:00:32:
你用丙酮溶解肯定做不出来

为什么啊？能不能解释一下啊？救命！
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3楼2011-12-13 08:37:48
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haha5151983

银虫 (著名写手)
关注。
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4楼2011-12-13 08:49:55
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zz831024

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西湖醉鱼(金币+2): 欢迎常来 2011-12-13 21:36:35
丙酮极性和你的流动相相差很大，溶剂效应会很大，所以你的重现性不好，而且丙酮紫外吸收也太强。如果样品水溶性不好，可以用甲醇溶解，再逐渐添加适量水，这样溶剂效应就可以避免了。
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5楼2011-12-13 13:43:36
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wjydyky

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by zz831024 at 2011-12-13 13:43:36:
丙酮极性和你的流动相相差很大，溶剂效应会很大，所以你的重现性不好，而且丙酮紫外吸收也太强。如果样品水溶性不好，可以用甲醇溶解，再逐渐添加适量水，这样溶剂效应就可以避免了。

胡萝卜素在甲醇中的溶解性很小，几乎不溶！
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6楼2011-12-13 15:19:54
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zz831024

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by wjydyky at 2011-12-13 15:19:54:
胡萝卜素在甲醇中的溶解性很小，几乎不溶！

噢抱歉，对胡萝卜素的特点不了解。那你可以试一下其他极性更小一点的溶剂，例如乙腈，四氢呋喃等，或者用丙酮溶解后再逐渐加水。只用丙酮是不行的。
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wjydyky
7楼2011-12-13 15:21:53
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wjydyky

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by zz831024 at 2011-12-13 15:21:53:
噢抱歉，对胡萝卜素的特点不了解。那你可以试一下其他极性更小一点的溶剂，例如乙腈，四氢呋喃等，或者用丙酮溶解后再逐渐加水。只用丙酮是不行的。

谢谢，我把流动相改了，用甲醇和乙酸乙酯，现在能跑出来了，但是α-和β-胡萝卜素不能很好的分离，条件还在摸索中。。。十分感谢各位的帮助！！！
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8楼2011-12-13 18:01:31
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foxling2

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by wjydyky at 2011-12-13 18:01:31:
谢谢，我把流动相改了，用甲醇和乙酸乙酯，现在能跑出来了，但是α-和β-胡萝卜素不能很好的分离，条件还在摸索中。。。十分感谢各位的帮助！！！

胡萝卜素这种有很多种构型的，极性差异小，要想在常规C18上分离比较困难吧。用C30色谱柱文献显示是很好分离的
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yyh
9楼2011-12-13 21:41:10
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wjydyky

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by foxling2 at 2011-12-13 21:41:10:
胡萝卜素这种有很多种构型的，极性差异小，要想在常规C18上分离比较困难吧。用C30色谱柱文献显示是很好分离的

没有C30的柱子，只有反相C18
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10楼2011-12-14 12:27:31
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