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xiaoyang123

金虫 (小有名气)

[求助] PCR(NEB Taq2X Master Mix)

最近订了NEB的Taq2X Master Mix,说明书上的PCR反应条件有点特别,预变性95℃ 30s,延伸温度68℃,而通常预变性是95℃ 5min,延伸温度72℃。应该按照说明书进行PCR呢,还是根据以往的条件来设定呢?
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linatracy

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也用那个了,就按说明书上走,效果挺好的
5楼2012-02-07 22:52:18
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助! 2011-12-10 14:52:07
xiaoyang123(金币+2): 2011-12-11 18:35:26
按说明书来吧,NEB LongAmp® Taq 2X Master Mix官网上FAQs有说明
Q4: Can the extension step be carried out at 72°C when using LongAmp?
A4: Yes, LongAmp Taq DNA Polymerase can be used at 72°C. However, extension at 65–68°C is a better choice for most amplicons.

另外,预变性30s一般就够了
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2011-12-10 00:28:57
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linatracy

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励交流使用经验 2012-02-06 22:28:27
5分钟没有问题,我也买那个了,说明书写的是2-5min,我用5min扩的,效果挺好的
3楼2011-12-13 17:05:48
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dongxm

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2012-02-06 22:28:34
两者都是可以的,一般预变性1分钟就可以了。
4楼2012-02-06 20:18:40
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