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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR（NEB Taq2X Master Mix）
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xiaoyang123

金虫 (小有名气)

[求助] PCR（NEB Taq2X Master Mix）

最近订了NEB的Taq2X Master Mix，说明书上的PCR反应条件有点特别，预变性95℃ 30s，延伸温度68℃，而通常预变性是95℃ 5min，延伸温度72℃。应该按照说明书进行PCR呢，还是根据以往的条件来设定呢？
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1楼 2011-12-09 20:55:13
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linatracy

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也用那个了，就按说明书上走，效果挺好的
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5楼2012-02-07 22:52:18
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2011-12-10 14:52:07
xiaoyang123(金币+2): 2011-12-11 18:35:26
按说明书来吧，NEB LongAmp® Taq 2X Master Mix官网上FAQs有说明
Q4: Can the extension step be carried out at 72°C when using LongAmp?
A4: Yes, LongAmp Taq DNA Polymerase can be used at 72°C. However, extension at 65–68°C is a better choice for most amplicons.

另外，预变性30s一般就够了
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2011-12-10 00:28:57
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linatracy

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励交流使用经验 2012-02-06 22:28:27
5分钟没有问题，我也买那个了，说明书写的是2-5min，我用5min扩的，效果挺好的
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3楼2011-12-13 17:05:48
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dongxm

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2012-02-06 22:28:34
两者都是可以的，一般预变性1分钟就可以了。
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4楼2012-02-06 20:18:40
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