24小时热门版块排行榜    

查看: 2244  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Tracyli

铁虫 (正式写手)

[求助] 审稿意见求助,关于ELISA法,谢谢!

paper审稿意见回来了,其中有一点不是很明白,请各位大虾帮帮忙,先谢谢了!!!!
我的论文里有个实验是用ELISA法(不是用试剂盒)测定血清中流感病毒特异性抗体IgG的含量,方法如下:
    用流感病毒液(病毒滴度为105.0 TCID50/mL)包被96孔板,4℃下保存16h。在包被孔中加入50μl 的1%小牛血清-含0.05%吐温20 PBS溶液(PBST),然后分别加入50μl不同稀释度的小鼠血清,设复孔、阴性对照,37℃下培养1h。用PBST洗三次,加入l:200 HRP标记的羊抗小鼠lgG抗体,培养1h后用PBST洗板,每孔加入50μl的OPD-H202底物显色,用H2SO4终止反应。空白调零后,在酶标仪上测定各孔的光密度(405 nm)。然后我将各组的OD值均数作图放在结果上。
    审稿人提出 “data should not be presented as OD but rather in absolute values (i.e. pg/ml or IU)”
    我以前没做过ELISA,这个实验如果要测出病毒特异性抗体的含量,应该是要用特异性抗体(明确含量)的血清做标准曲线吧?但是这样是不是要纯化病毒特异性抗体呢?还是用普通的小鼠抗体IgG加入血清做标准曲线即可呢?
    有哪位虫友做过这方面的实验呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

grandstone

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

Tracyli(金币+5): 谢谢! 2011-11-25 19:00:00
最好不要用OD值,或者你用抑制率来表示呢?
4楼2011-11-25 16:33:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

jiezibeilin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
seapass(金币+3): 鼓励新虫交流!欢迎常来投稿版! 2011-11-25 13:44:10
Tracyli(金币+5): 谢谢! 2011-11-25 16:06:59
1.审稿人提出的问题的意思是:你在文中表述数据结果的时候不应该是OD值,应该是你测定的目标抗体的含量,就是要把你测定的OD值根据标准曲线计算成抗体含量(单位用pg/ml或者是国际单位)
2.你关于标准曲线的疑惑:
你的目的是要测定流感病毒特异性抗体,所以你肯定要用流感病毒特异性抗体(已知浓度)来坐标准曲线。 这一点我能肯定。
另外,是不是需要纯化的病毒特异性抗体,从理论上来说,应该是要纯化的,但是我没有做过。这一点我不能确定。抱歉。
2楼2011-11-25 13:40:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Tracyli

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jiezibeilin at 2011-11-25 13:40:33:
1.审稿人提出的问题的意思是:你在文中表述数据结果的时候不应该是OD值,应该是你测定的目标抗体的含量,就是要把你测定的OD值根据标准曲线计算成抗体含量(单位用pg/ml或者是国际单位)
2.你关于标准曲线的疑惑 ...

如果是要用病毒的特异性抗体就郁闷了,从血清里分离病毒特异性抗体到做标准曲线,估计等我把这部分工作做完,也得半年了,因为以前没做过...如果我坚持用OD值,不做标准曲线了,我又担心直接被拒掉了,哎
3楼2011-11-25 16:15:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Tracyli

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by grandstone at 2011-11-25 16:33:33:
最好不要用OD值,或者你用抑制率来表示呢?

我的药是增强免疫的,不能用抑制率吧?而且用抑制率怎么回答审稿人呢?谢谢
5楼2011-11-25 17:46:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 17/850 2026-11-13 17:38 by 寻迹天涯浪潮
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 5/250 2026-11-13 11:37 by Equinoxhua
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 7/350 2026-11-13 10:55 by Equinoxhua
[考博] 27博士 +5 锦鲤送福至 2026-11-10 5/250 2026-11-13 06:22 by wlf1982
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[基金申请] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:33 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:31 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:03 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 5/250 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:41 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:38 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:27 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 3/150 2026-11-12 08:26 by HajghKOMynmz
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:53 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:03 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 17:03 by TgvkbZZl9tqB
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
信息提示
请填处理意见