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silverinch

新虫 (初入文坛)

[求助] 同一物质 同次进样 保留时间不同

求助HPLC达人。
本人做了一个蛋白酶切样品的HPLC反相柱子分离。结果有一个多肽在两个不同位置出峰(间隔大约5 min左右),其他多肽没有这种情况。而且经过氨基酸测序鉴定,这两个峰的的确确是一个东西。怎么解释啊?
为什么在多肽混合物中有且只有一个肽段出现这种情况?
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silverinch

新虫 (初入文坛)

不是啊 是同一针进样 然后在一个色谱图中的有两个峰 经过鉴定 那两个峰是一个东西
3楼2011-11-24 18:05:39
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silverinch

新虫 (初入文坛)

液相是瓦里安的 检测是根据一次和二次 MALDI-TOF鉴定的
没有换流动相 每次做这个肽段混合物 都会出现这个问题
6楼2011-11-25 08:09:27
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silverinch

新虫 (初入文坛)

是不是有可能是非对映异构体?但是这个多肽是蛋白胰蛋白切的产物 该蛋白是由大肠杆菌发酵得来的  会产生非对映体?变成生物的问题了
8楼2011-11-25 15:43:08
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silverinch

新虫 (初入文坛)

我个人觉得用maldi-tof检测的一次、二次都一致  应该比SDS精准
11楼2011-11-25 16:07:52
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