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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助 SSR实验技术
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xiaochangwen

银虫 (小有名气)

[求助] 求助 SSR实验技术

我做的是玉米SSR标记 同一批试剂 是在半年前买的，半年前做的时候效果很好 得到的普带也很清晰  可最近做却做不出来了，不知道是什么原因。

这个是半年前做的



这个是最近做的，左侧点的是mark  500 400 300 200 150 100 50bp
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1楼 2011-11-23 19:02:06
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xiaochangwen

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wanhscn at 2011-11-24 21:54:50:
同意这个观点！

模板浓度是大了点  我用的大概是1ug，我昨天又用基因组dna跑了咯琼脂糖电泳，模板质量还可以，重新买了taq酶，换个酶试试，希望不是引物的问题 呵呵，因为我合了几十对引物呢，全降解了可就损失大了，呵呵
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9楼2011-11-25 07:04:12
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)
主要还是PCR的问题，是不是模板浓度太大了？
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漫洒英雄泪，相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行？一任俺芒鞋破钵随缘化！
2楼2011-11-23 21:21:53
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xiaochangwen

银虫 (小有名气)
一般模板量是多少ng？ 我用的是20ul的体系
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3楼2011-11-23 22:10:00
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cindywang88

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

xiaochangwen(金币+1): 恩 我再试试 谢谢 2011-11-24 09:39:23
重提一下模板看看，不是模板就是引物降解了。
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4楼2011-11-24 08:43:22
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