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hengton

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白透析复性的相关问题,求给力回复。

蛋白透析复性,用的是8mM咪唑溶解,离心后取上清透析,上清大概4ml
透析条件:
4M:   EDTA  1.86g;tris  6.05g;NaCl  146.1g  尿素  1201.2g   定容5L   ph8.0-8.5
以次类推:4M——4M——2M——2M——1M——1M——0M——0M
做的结果还行,我现在不理解的是EDTA、tris 、NaCl、等的作用目的及用量标准
这种方法是否适用所有的蛋白复性,还是只适用于特定的,其他的蛋白透析复性有哪些,最好举一些做过的实例,不懂的我后续会提问,给力的回答我不会吝啬金币的。
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zhb1986free

金虫 (初入文坛)

蛋白的复性过程,楼主有试过氧化型和还原型谷胱甘肽么?
NO CAN,BUT WILL。
3楼2012-03-23 09:14:29
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shenyubao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

hengton(金币+5): 很感谢你的回帖,有更多的实例就更好了,希望以后可以继续探讨。 2011-11-23 08:51:38
班友:EDTA、tris 、NaCl的作用分别为:鳌合金属离子、缓冲体系、改善蛋白表面电荷等,用量一般根据蛋白结构(二硫键多少、疏水性、二级结构状况)、等电点、蛋白特性去确定。具体用量既不适用于所有蛋白,也不具特定性,总之,涉及具体体系一定要根据蛋白情况进行摸索。祝班友好运!
2楼2011-11-21 15:02:54
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