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loveliping

木虫 (著名写手)


[交流] GC-MS检测和分析尿液中的氨基酸

a、        吸取600ul混标或者离心后的尿液上清液于带塞玻璃试管中,依次加入内标100ul(月桂酸甲酯,0.1㎎/ml);无水乙醇400ul、吡啶100ul和氯甲酸乙酯50ul,超声一分钟;
b、        反应后加入氯仿300ul,涡旋30s,3000rmp/min,离心10分钟,水层和氯仿层分离;
c、        加入7MNaOH溶液100ul(调节水层PH值至9-10)和ECF50ul,超声一分钟,涡旋30s,3000rmp/min,离心10分钟;
d、        弃掉水层,取出氯仿层,加入少量无水硫酸钠除净水分,从中取出200ul左右,2000rmp/min,离心2分钟,待GC/MS分析
我们用的柱子是TR-35MS,中等极性的柱子
帮我分析一下这些前处理中加入的溶剂和标样、内标之间会不会反应的时候生成杂质?
这就是我们的前处理方法,希望给予指导,我们的谱图中一直有杂质峰,查了一下,都是酯,不知道是从哪里带来的!
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loveliping

木虫 (著名写手)


引用回帖:
5楼: Originally posted by yi_zhou at 2011-11-21 15:36:36:
这个反应有副产物,而且实际上衍生得到的GC峰不高
单个进萃取溶剂,乙醇、吡啶等等,看杂质含量;另外,不加样品的水样做衍生反应,可分析杂质来源

我们做过空白,就是不加样品的水样,仍然有哪些杂质峰,我们单个走过一针氯仿,,没什么杂质峰,但是做样时就不行了,一直有!希望给予指导,谢谢!
6楼2011-11-21 15:52:19
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yi_zhou

木虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
padodo(金币+2): 2012-01-07 17:13:03
氯甲酸乙酯不仅仅衍生氨基酸
尿中很多酸类、胺类也反应了

[ Last edited by yi_zhou on 2011-11-21 at 09:16 ]
2楼2011-11-21 09:13:38
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loveliping

木虫 (著名写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by yi_zhou at 2011-11-21 09:13:38:
氯甲酸乙酯不仅仅衍生氨基酸
尿中很多酸类、胺类也反应了
[ Last edited by yi_zhou on 2011-11-21 at 09:16 ]

我们现在做的是标样,还没做尿样呢?实在不知道哪些杂质是从哪里来的?
3楼2011-11-21 09:21:03
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yi_zhou

木虫 (正式写手)


★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
loveliping(金币+6): 2011-11-21 15:49:09
引用回帖:
3楼: Originally posted by loveliping at 2011-11-21 09:21:03:
我们现在做的是标样,还没做尿样呢?实在不知道哪些杂质是从哪里来的?

这个反应有副产物,而且实际上衍生得到的GC峰不高
单个进萃取溶剂,乙醇、吡啶等等,看杂质含量;另外,不加样品的水样做衍生反应,可分析杂质来源
5楼2011-11-21 15:36:36
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简单回复
mithradet4楼
2011-11-21 15:34   回复  
loveliping(金币+1): 2011-11-21 15:59:01
lexiaoyao10楼
2011-11-22 09:40   回复  
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