应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 请教研究农杆菌的虫友
51/1返回列表
查看: 2490  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xn712100

银虫 (正式写手)

[求助] 请教研究农杆菌的虫友

我现在在做农杆菌介导的遗传转化，总觉得转化效率太低。我想试着去调整农杆菌的状态和浓度。但是，我不知道怎么去确定我所培养的农杆菌处于指数生长期，想请教有经验的虫友。还有农杆菌侵染的最佳时期真的是指数生长时期吗？怎么处理培养好的菌液，收集的菌体要怎样处理才能更好的保持它的侵染活性？
如果有相关的文献的话，也请虫友能分享一下。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸方面

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-11-19 16:37:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanmao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

先用LB过夜摇菌，达到OD0.8，再离心用同等量侵染液悬浮，侵染液应该是1/2MS的高渗溶液，侵染液的配方各个实验室不一样，悬浮后可以再放到28度摇床二十分钟，后进行侵染，可以加乙酰丁香酮。
赞一下 回复此楼
嘎嘎
5楼2011-11-29 09:01:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

hanmao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

xn712100(金币+5): 谢谢！我现在转化的是马铃薯。你是指侵染时的ＯＤ值吗？我需要先把农杆菌培养到一定时期，收集菌体用液体ＭＳ悬浮后，再以０.５－１.０的ＯＤ值进行侵染，但是效果不是很好。 2011-11-29 08:38:26
这要看你的菌株类型，文献上写的也不是很统一。
农杆菌菌株GV3101一般我们选用OD600为0.8时进行侵染，你转化受体是哪种植物啊
赞一下 回复此楼
嘎嘎
2楼2011-11-28 09:07:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

玛格丽特1985

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫 2011-11-29 08:48:46
我用的是农杆菌菌株GV3101，OD值0.4-0.6之间时长的很快，但是不知道什么时候侵染最好，希望得到帮助！
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-11-28 23:02:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lgqcc

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-29 08:49:00
xn712100(金币+5): 谢谢！您说的这三种菌株我都有做过，个人觉得ＥＨＡ１０５要好一点。您所说的梯度实验，我也做过但是效果不明显。对遗传转化来说，实验周期太长。个人觉得转化时菌株的状态比较重要，想知道怎么判断菌株的活力水平，以及收集菌体后如何保持它的活力状态。希望您不惜赐教！ 2011-11-29 10:05:54
引用回帖:
3楼: Originally posted by 玛格丽特1985 at 2011-11-28 23:02:24:
我用的是农杆菌菌株GV3101，OD值0.4-0.6之间时长的很快，但是不知道什么时候侵染最好，希望得到帮助！

没做过这种的，我用过LBA4404、AGL-1、EHA105，不同菌株的最适合OD值是不一样的，建议从0.6-1.0做一个梯度试验。转化效率和宿主的状态、共孵育条件都有很大关系，祝好运。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-11-29 08:16:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +16 ioodiiij 2026-04-08 16/800 2026-04-09 23:08 by wolf97
[考研] 348求调剂 +3 candyyyi 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:20 by 段伟艳
[考研] 材料工程调剂 +12 小刘同学吖吖 2026-04-06 13/650 2026-04-09 17:07 by luoyongfeng
[考研] 085600材料与化工，求调剂 +11 won_qii 2026-04-07 11/550 2026-04-09 17:03 by luoyongfeng
[考研] 0703化学调剂325分 +13 15771691647 2026-04-04 15/750 2026-04-09 16:55 by 15771691647
[考研] 化学调剂求助 +14 LULONG1 2026-04-03 19/950 2026-04-09 10:43 by chenxi233
[考研] 求调剂 +14 张zic 2026-04-05 15/750 2026-04-08 16:14 by 一只好果子?
[考研] 277求调剂 +4 考研调剂lxh 2026-04-06 6/300 2026-04-08 10:40 by 逆水乘风
[考研] 计算机408｜在校多次国家级竞赛获奖｜申请调剂 +4 东山大白鹅 2026-04-05 4/200 2026-04-08 00:18 by chongya
[考研] 生物医药调剂｜SCI中科院三区一作+多项科研成果 +8 likangxing 2026-04-07 11/550 2026-04-08 00:02 by lys0704
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
[考研] 297分083200求助 +9 aekx 2026-04-05 9/450 2026-04-06 20:57 by flysky1234
[考研] 材料与化工363求推荐 +11 zh096 2026-04-04 11/550 2026-04-06 19:14 by guanxin1001
[考研] （调剂）一志愿报考哈尔滨工业大学0857资源与环境专业378分考生 +7 狠狠加油 2026-04-05 8/400 2026-04-06 16:52 by momo皓
[考研] 320求调剂 +3 一样圆 2026-04-04 3/150 2026-04-04 22:29 by 啵啵啵0119
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-03 4/200 2026-04-04 22:17 by hemengdong
[考研] 本9一志愿2 0854低分专硕286求调剂 +9 芒种111 2026-04-04 9/450 2026-04-04 11:01 by tangruihua
[考研] 338求调剂 +4 zzz，，r 2026-04-03 4/200 2026-04-03 16:39 by lijunpoly
[考研] 0705理学294求调剂 +3 成果成果cg5 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:04 by simons1972
[考研] 一志愿北京交通大学材料工程总分358 +4 cs0106 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:41 by 百灵童888
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭