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[求助]
请教研究农杆菌的虫友
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我现在在做农杆菌介导的遗传转化，总觉得转化效率太低。我想试着去调整农杆菌的状态和浓度。但是，我不知道怎么去确定我所培养的农杆菌处于指数生长期，想请教有经验的虫友。还有农杆菌侵染的最佳时期真的是指数生长时期吗？怎么处理培养好的菌液，收集的菌体要怎样处理才能更好的保持它的侵染活性？ 如果有相关的文献的话，也请虫友能分享一下。 |
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 核酸方面 |
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【答案】应助回帖
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zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-29 08:49:00
xn712100(金币+5): 谢谢！您说的这三种菌株我都有做过，个人觉得ＥＨＡ１０５要好一点。您所说的梯度实验，我也做过但是效果不明显。对遗传转化来说，实验周期太长。个人觉得转化时菌株的状态比较重要，想知道怎么判断菌株的活力水平，以及收集菌体后如何保持它的活力状态。希望您不惜赐教！ 2011-11-29 10:05:54
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-29 08:49:00
xn712100(金币+5): 谢谢！您说的这三种菌株我都有做过，个人觉得ＥＨＡ１０５要好一点。您所说的梯度实验，我也做过但是效果不明显。对遗传转化来说，实验周期太长。个人觉得转化时菌株的状态比较重要，想知道怎么判断菌株的活力水平，以及收集菌体后如何保持它的活力状态。希望您不惜赐教！ 2011-11-29 10:05:54
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没做过这种的，我用过LBA4404、AGL-1、EHA105，不同菌株的最适合OD值是不一样的，建议从0.6-1.0做一个梯度试验。转化效率和宿主的状态、共孵育条件都有很大关系，祝好运。 |
4楼2011-11-29 08:16:27
2楼2011-11-28 09:07:16
3楼2011-11-28 23:02:24
5楼2011-11-29 09:01:10