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汕头大学海洋科学接受调剂
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wenjingcat

至尊木虫 (知名作家)

[求助] 如何解决分光度法测量时出现的试剂乳化问题

请教诸位大侠:做抗氧化试验时,样品为乙酸乙酯提取物,用甲醇溶解后做清除羟自由基试验,加入显色剂(水杨酸,FeSO4,H2O2)时产生乳化现象干扰吸光度测量,如何解决?紫外-可见分光光度法测量总黄酮时,如何解决样品本身自带的颜色对吸光度的影响??一些溶解于低极性试剂的物质如石油醚提取物,乙酸乙酯提取物,在需要加入水溶液试剂,然后用分光光度法测量时,怎样解决溶剂乳化的问题???
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我的眼里只有小白,哈哈
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wenjingcat at 2011-11-18 17:53:56:
有考虑是溶质析出,但是用10000r/min离心后溶液仍然是浑浊的,吸光度很高。总黄酮测定时用芦丁做标准曲线,由于样品自带颜色,测吸光度时远超芦丁的线性范围。测波长差是如何操作的?

溶剂之间的相溶性不好,所致!
5楼2011-11-21 08:02:41
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

wenjingcat(金币+20): 谢谢回复 2011-11-18 17:53:32
引用回帖:
1楼: Originally posted by wenjingcat at 2011-11-18 09:07:28:
请教诸位大侠:做抗氧化试验时,样品为乙酸乙酯提取物,用甲醇溶解后做清除羟自由基试验,加入显色剂(水杨酸,FeSO4,H2O2)时产生乳化现象干扰吸光度测量,如何解决?紫外-可见分光光度法测量总黄酮时,如何解决 ...

你所描述的现象应该不算是乳化现象,应该属于溶剂的极性变化后,里面的溶质或加入的物质析出,或者两者溶剂不互溶所致!
没办法的,只能通过改变溶剂,把甲醇换为乙醇,或异丙醇试验一下了!
黄酮测定问题,背景吸收扣除问题,可以分离总黄酮,将固体溶解后再测定
也可以取不含黄酮的溶液做参比,然后在测定
也可以看一下二者的波长差,看能否错开一点(比如黄酮不取最大波长位置!)
2楼2011-11-18 09:32:27
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wenjingcat

至尊木虫 (知名作家)

有考虑是溶质析出,但是用10000r/min离心后溶液仍然是浑浊的,吸光度很高。总黄酮测定时用芦丁做标准曲线,由于样品自带颜色,测吸光度时远超芦丁的线性范围。测波长差是如何操作的?
我的眼里只有小白,哈哈
3楼2011-11-18 10:07:22
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wenjingcat

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chaijudi at 2011-11-18 09:32:27:
你所描述的现象应该不算是乳化现象,应该属于溶剂的极性变化后,里面的溶质或加入的物质析出,或者两者溶剂不互溶所致!
没办法的,只能通过改变溶剂,把甲醇换为乙醇,或异丙醇试验一下了!
黄酮测定问题,背 ...

有考虑是溶质析出,但是用10000r/min离心后溶液仍然是浑浊的,吸光度很高。总黄酮测定时用芦丁做标准曲线,由于样品自带颜色,测吸光度时远超芦丁的线性范围。测波长差是如何操作的?
我的眼里只有小白,哈哈
4楼2011-11-18 17:53:56
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