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370769676

银虫 (正式写手)

[交流] GFP的相关问题 已有2人参与

想请问下：如果GFP变性了还能发出荧光嘛？
          另请教如果要同时做表面染色和胞内染色（Brdu）需要注意什么？
          感谢！！！
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1楼 2011-11-17 10:55:50
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nach

铜虫 (著名写手)

不让吃就去死
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
金光闪闪2010(金币+1): 2011-11-20 12:24:26
引用回帖:
1楼: Originally posted by 370769676 at 2011-11-17 03:55:50:
想请问下：如果GFP变性了还能发出荧光嘛？
          另请教如果要同时做表面染色和胞内染色（Brdu）需要注意什么？
          感谢！！！

变性了就不能发荧光了。只在390nm左右有一个吸收峰。因为GFP发射荧光是依托于整个分子的结构，发色团与很多氨基酸之间存在氢键，被激发的发色团需要通过氢键向Glutamate222转移质子，随后才能发射荧光，可见氢键对于发色团的激发至关重要。变性的GFP没有了发色团与周围环境的氢键，所以只吸收不激发
赞一下(2人) 回复此楼
不让吃就去死
3楼2011-11-20 03:46:54
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小小微生物

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
金光闪闪2010(金币+1): 2011-11-20 12:24:30
变形了应该不能发荧光吧
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-11-18 08:47:01
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