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scncwxy

木虫 (著名写手)

[求助] 细胞培养总是发现有不少漂浮物

细胞贴壁,也没有污染。就是发现镜下有不少漂浮物,自己觉得是死细胞,换了培养基第二天又出现不少,请问这是怎么回事?
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木虫 (著名写手)

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2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2011-11-16 19:05:38:
首先看看培养液是不是也有悬浮物。
其次,如果细胞长的比较密,也会有细胞悬浮起来的。

培养基中是没有的,换液后镜下观察很澄清,第二天就有了。细胞没有长满

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3楼2011-11-16 19:44:59
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木虫 (著名写手)

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4楼: Originally posted by lxyyzz at 2011-11-17 08:37:05:
什么细胞?有的细胞是悬浮贴壁都有的

MCF-7贴壁啊
7楼2011-11-17 10:20:13
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木虫 (著名写手)

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6楼: Originally posted by linyingjia at 2011-11-17 09:40:13:
染菌了吧    染菌后可能会有细胞漂浮

我觉得不是,染菌了整个就浑浊了,而我的培养基还是澄清啊
8楼2011-11-17 10:21:59
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9楼: Originally posted by jjxcz at 2011-11-17 11:21:34:
我觉得是死细胞,换液会导致一部分细胞不适应,或者是换液不小心冲到了细胞,导致细胞贴壁性不好,第二天就会死去

我换液是直接把从4度冰箱的培养液加到培养瓶中,估计是有损伤吧
10楼2011-11-17 14:50:51
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木虫 (著名写手)

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15楼: Originally posted by wukejing at 2011-11-17 17:48:45:
对啊,没有培养液是澄清的就没有染菌,我最近养的细胞,有些区域长的很稀60-70%,但大部分贴壁良好,长到80-90%,可能就是在换液的时候,枪头的气流使得部分地方贴壁不紧,还有就是可能是 培养瓶某些地方没有洗干 ...

越来越复杂了
16楼2011-11-17 18:54:07
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木虫 (著名写手)

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9楼: Originally posted by jjxcz at 2011-11-17 11:21:34:
我觉得是死细胞,换液会导致一部分细胞不适应,或者是换液不小心冲到了细胞,导致细胞贴壁性不好,第二天就会死去

再请教一个问题,细胞复苏时,DMSO需要离心去掉吗?还是说直接加培养基培养?
17楼2011-11-17 18:56:03
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木虫 (著名写手)

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18楼: Originally posted by wukejing at 2011-11-17 20:38:54:
我们是直接加的,本来是有离心这步的,因为会损伤细胞,可以不用。

听说DMSO很影响细胞,这几次复苏直接加的,培养了一天绝大部分还是漂着的,极少的细胞贴壁,生长极为缓慢,郁闷啊
20楼2011-11-17 23:09:13
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木虫 (著名写手)

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23楼: Originally posted by wukejing at 2011-11-18 19:47:00:
给你推荐个复苏的视频,注意一些细节·http://www.tudou.com/programs/view/NRuJBsIdiPk/

谢谢啊,感激不尽
24楼2011-11-18 22:54:33
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