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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞培养总是发现有不少漂浮物
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jjxcz

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

scncwxy(金币+2): 以前都没注意到，下次试试 2011-11-17 15:25:43
引用回帖:
10楼: Originally posted by scncwxy at 2011-11-17 14:50:51:
我换液是直接把从4度冰箱的培养液加到培养瓶中，估计是有损伤吧

4度呀，应该放在37度水浴锅里温浴15-30分钟的，这样细胞损伤会小很多的。
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11楼2011-11-17 14:53:14
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lipei77

禁虫 (初入文坛)
scncwxy(金币+2): 呵呵，正解啊 2011-11-17 16:44:20
本帖内容被屏蔽
12楼2011-11-17 15:43:10
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飞雪流萤

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

scncwxy(金币+2): 2011-11-17 16:44:37
按照楼主的说法，估计是培养基温度过低吧，我一般都是放在室温下一段时间再加入，另外是不是加入培养基时过快，对细胞冲击力过大造成细胞损伤啊
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13楼2011-11-17 16:02:02
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kaobo2012

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by scncwxy at 2011-11-16 19:44:59:
培养基中是没有的，换液后镜下观察很澄清，第二天就有了。细胞没有长满

突然想起来了，有的人说是纤维蛋白，不知道是不是确实如此，呵呵，参考一下吧。
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14楼2011-11-17 17:42:43
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wukejing

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
silicare(金币+3): 谢谢参与 2011-11-18 10:57:58
引用回帖:
9楼: Originally posted by jjxcz at 2011-11-17 11:21:34:
我觉得是死细胞，换液会导致一部分细胞不适应，或者是换液不小心冲到了细胞，导致细胞贴壁性不好，第二天就会死去

对啊，没有培养液是澄清的就没有染菌，我最近养的细胞，有些区域长的很稀60-70%，但大部分贴壁良好，长到80-90%，可能就是在换液的时候，枪头的气流使得部分地方贴壁不紧，还有就是可能是 培养瓶某些地方没有洗干净什么的吧~
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坚强、乐观、自信、豁达！
15楼2011-11-17 17:48:45
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scncwxy

木虫 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by wukejing at 2011-11-17 17:48:45:
对啊，没有培养液是澄清的就没有染菌，我最近养的细胞，有些区域长的很稀60-70%，但大部分贴壁良好，长到80-90%，可能就是在换液的时候，枪头的气流使得部分地方贴壁不紧，还有就是可能是 培养瓶某些地方没有洗干 ...

越来越复杂了
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16楼2011-11-17 18:54:07
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scncwxy

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by jjxcz at 2011-11-17 11:21:34:
我觉得是死细胞，换液会导致一部分细胞不适应，或者是换液不小心冲到了细胞，导致细胞贴壁性不好，第二天就会死去

再请教一个问题，细胞复苏时，DMSO需要离心去掉吗？还是说直接加培养基培养？
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17楼2011-11-17 18:56:03
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wukejing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by scncwxy at 2011-11-17 18:56:03:
再请教一个问题，细胞复苏时，DMSO需要离心去掉吗？还是说直接加培养基培养？

我们是直接加的，本来是有离心这步的，因为会损伤细胞，可以不用。
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坚强、乐观、自信、豁达！
18楼2011-11-17 20:38:54
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
应该是细胞状态不好，传几次代可能会好些的~  注意消化的时间不要太长
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
19楼2011-11-17 20:46:42
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scncwxy

木虫 (著名写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by wukejing at 2011-11-17 20:38:54:
我们是直接加的，本来是有离心这步的，因为会损伤细胞，可以不用。

听说DMSO很影响细胞，这几次复苏直接加的，培养了一天绝大部分还是漂着的，极少的细胞贴壁，生长极为缓慢，郁闷啊
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20楼2011-11-17 23:09:13
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