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luodi911

铁虫 (小有名气)

[求助] 大鼠肝微粒体代谢不出产物

提了若干次肝微粒体,活性不是太好,我用的是蔗糖匀浆,CaCl2处理,Tris-HCl缓冲液重悬,所有操作都在冰上完成,比较迅速。请问缓冲体系是否有影响?大鼠我用了雌性,为什么文献中都用雄性呢?还有是否用了诱导剂效果会好一些?实验进展不顺,请诸位帮帮。谢谢!我只有这么多金币了,谢谢诸位!
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Nancy1988

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

文献一般用雄性,因为雄性代谢能力普遍比雌性高,但是这应该不是绝对影响因素,重要的是你的缓冲也是什么配方,而且微粒体要-80℃保存。匀浆其实也可以用缓冲液匀浆的哈。诱导剂会影响你待测药物代谢吧。还有离心机离心时也要4℃哦~建议还是从提取过程中来找原因。也有可能你微粒体终浓度太低了。重悬缓冲液体积减半试试看呢
2楼2012-11-21 23:25:17
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

是不是有可能孵育体系不合适呢
你是一相还是二相代谢
需要加入的辅因子是不一样的
3楼2012-11-22 08:40:31
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