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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 重组蛋白前面会不会有其他的氨基酸残基
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瞎眼猪猪

新虫 (初入文坛)

[求助] 重组蛋白前面会不会有其他的氨基酸残基

用pic9k重组了一个蛋白，转到毕赤酵母里，诱导表达后只有一条带，想去鉴定一下是不是自己要的蛋白，做N端测序的话，不知道会不会在我目标序列的前面留有几个别的氨基酸序列（我是只载体上的序列会不会有个别的翻译成氨基酸？
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我自诩一只猪
1楼2011-11-14 00:44:14
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cpubiopharm

铜虫 (小有名气)
这东西做起来很快，我是指分子构建。如果N端多余的氨基酸可能影响结构或者活性，为了保险起见，你可以重新构建。或者加入酶识别位点如Enterokinase之类的；也可以尝试融合intein表达然后自裂解。祝顺利！
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我不知道
12楼2011-11-18 06:06:11
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凡夫俗子

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

This could not be happened in your experiment.
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2楼2011-11-14 11:02:21
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瞎眼猪猪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 凡夫俗子 at 2011-11-14 11:02:21:
This could not be happened in your experiment.

弱弱的问一句：为啥？启动子后面的一段不会翻译么？
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我自诩一只猪
3楼2011-11-14 21:20:56
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terry130

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

没做过酵母的重组蛋白。在E colli里重组蛋白的话，启动子区域内第一个起始密码子之后的序列会被翻译成蛋白，你找下你用的vector的序列信息自己对一下就好了
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摒气动方息，宁神心自明。
4楼2011-11-15 08:12:32
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