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求问：sigma 生物素NHS-Biotin（H1795）谁用过？低浓度连抗体是否连不上？
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各位高手，我用的sigma的H1795货号的生物素连抗体，步骤如下。 低浓度的抗体：用缓冲液配好的0.1mg/ml 纯化过的抗体（超滤过叠氮钠）100ul 和DMF溶解的0.22mg/ml 生物素 5ul 于25度下反应2小时（摇床中），加入4ul 0.01M NH4Cl 温育10min，PBS超滤3次，贮存为0.1mg/ml . 看到一些讨论说连接反应ph 很重要，试过7.4 8.5 9.5三种PH，好像都没反应上。 想问问是不是这种标记反应需要高浓度，像我这种低浓度就不行啦？ |
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lynni
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