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fldzm04

金虫 (小有名气)

[求助] 求真菌表达载体pBARGPE1的序列

各位虫子，哪位有真菌表达载体pBARGPE1的序列啊？能否共享一下？我的邮箱fldzm04@126.com, 感激不尽！
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1楼 2011-11-13 21:33:23
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fldzm04

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good! 2011-12-17 13:13:03
西瓜: 回帖置顶 2011-12-17 13:13:12
虫友你好！这个载体质粒是有问题的。我也是，用了3个MCS处的酶和1个载体骨架上的酶，都没有切开，后来又设计了gpda和trpc terminator 的引物，也扩增不出来，所以我现在已经放弃用这个载体了。不过，载体上的trpc promoter和bar基因是可用的。
酶切位点划横线是说明这个位点在这个载体上是唯一的，不加横线的则是有多个位点，所以，如果要插入外源基因的话最好选择加横线的哪些位点。
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zzjzheng
6楼2011-12-17 12:06:17
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

fldzm04(金币+2): 这个也很有用，如果有MCS处的序列就更好了，这样设计引物的时候就可以知道是否是正确的读码框 2011-11-14 10:57:20
序列没有，只有图谱：http://www.fgsc.net/fgn/pall.html
希望对你有用。
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2楼2011-11-14 07:44:51
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zzjzheng

禁虫 (正式写手)
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3楼2011-12-16 17:00:18
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zzjzheng

禁虫 (正式写手)
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4楼2011-12-16 17:04:17
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zzjzheng at 2011-12-16 17:04:17:
你好，看你有用过真菌表达质粒pBARGPE1，我最近也在用，不知道你这个质粒做酶切了没有，我用BamH I，Pst I酶切，可是没切开，不知怎么回事，希望能够提供帮组，不甚感激…… 还有你提供的哪些质粒图谱上酶切位点 ...

抱歉，我没用过这个质粒，只是帮楼主找到这个质粒图谱而已，你还是问问楼主，他在用的。
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5楼2011-12-16 20:38:15
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zzjzheng

禁虫 (正式写手)
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7楼2011-12-17 12:17:16
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fldzm04

金虫 (小有名气)
不好意思，我可能给不了你好的建议，我也是刚开始做这个实验，证实pBARGPE1载体有问题也是上周的事，我现在也正在努力寻找目标载体。
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8楼2011-12-18 08:46:41
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zzjzheng

禁虫 (正式写手)
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9楼2011-12-18 21:59:40
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zzjzheng

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10楼2011-12-18 22:00:59
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