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RT-PCR 产量低!江湖告急!老板,大侠救命啊!
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江湖告急!老板,大侠救命啊!RNA提出来了,用BIOrad 的反转录盒子做的反转录。根据说明书用2ul cDNA做模板进行PCR. 5个基因有四个p出来了,大小都对。但是现在问题来了,5个中4个产量超低,加10ul跑胶才能看见比较弱的一条带。调整退火温度,Mg 浓度都试了可是还是产量上不去。空白对照也做了,不可能是污染。最搞的是Taq搞得出来,pfu搞不出来。老板能不能帮帮解决一下啊!谢谢!只要pcr产物浓度上去就成 |
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13楼2011-11-10 11:58:41
临风7071
木虫 (正式写手)
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2楼2011-11-08 20:50:47
3楼2011-11-08 21:23:22
空谷幽风
金虫 (正式写手)
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4楼2011-11-08 21:55:37










江湖告急!老板,大侠救命啊!RNA提出来了,用BIOrad 的反转录盒子做的反转录。根据说明书用2ul cDNA做模板进行PCR. 5个基因有四个p出来了,大小都对。但是现在问题来了,5个中4个产量超低,加10ul跑胶才能看见比较弱的一条带。调整退火温度,Mg 浓度都试了可是还是产量上不去。空白对照也做了,不可能是污染。最搞的是Taq搞得出来,pfu搞不出来。老板能不能帮帮解决一下啊!谢谢!只要pcr产物浓度上去就成
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