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hejiansgbo

新虫 (小有名气)

[求助] 液相色谱分析样品 柱压很高??怎么办才好??

柱压高~~~~~~··
我们用的是岛津的15C,前两天,觉得柱压有点高,用纯甲醇0.4的流速冲,结果柱压更高了!而且还高的有点离谱,0.4的都到19.6了,而且还19.2-19.6来回的波动,   各位给点建议吧
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hupanyong

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
jiangchunyong(金币+2): 谢谢 2011-11-07 12:33:33
1 . 清洗色谱柱---清除色谱柱污染物和堵塞的柱填料---大分子量/色谱柱吸附物--样品或缓冲液沉淀
2.反冲色谱柱--- 清洗堵塞的陶瓷片
3.更换陶瓷片
检查有 / 无色谱柱时系统的压力柱压问题有时由系统或预柱堵塞引起

冲洗色谱柱--用比流动相更强的溶剂
反相色谱柱   用以下溶剂至少各25mL冲洗色谱柱(分析柱)
不含缓冲盐的流动相
• 100%甲醇
• 100%乙腈
• 75%乙腈+25%异丙醇
• 100%异丙醇
• 100%二氯甲烷 *
• 100%己烷*
*若使用己烷或二氯甲烷冲洗色谱柱,则在重新使用反相流动相以前,必须用异丙醇冲洗色谱柱 !!

正相色谱柱
用以下溶剂至少各50mL冲洗色谱柱(分析柱)
• 50%甲醇+50%三氯甲烷
• 100%乙酸乙酯


希望有用
2楼2011-11-07 12:27:47
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hejiansgbo

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hupanyong at 2011-11-07 12:27:47:
1 . 清洗色谱柱---清除色谱柱污染物和堵塞的柱填料---大分子量/色谱柱吸附物--样品或缓冲液沉淀
2.反冲色谱柱--- 清洗堵塞的陶瓷片
3.更换陶瓷片
检查有 / 无色谱柱时系统的压力柱压问题有时由系统或预柱堵塞引 ...

关键是柱压太高了,0.4的流速,柱压都快到20啦    流动相   甲醇:水   8:2

刚开始时14.3,用纯甲醇冲了大概2个小时,到升到19.6,就没干在冲拉

色谱柱用了快一年了,每天至少要做10个左右,异丙醇低流速冲洗一下,然后用甲醇冲洗 了,不管用
3楼2011-11-07 17:21:39
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marine070916

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 多谢提供! 2011-11-07 23:48:57
具我的经验。柱子可能被某些成分堵塞了。用缓冲盐冲再用水冲,再用甲醇。
4楼2011-11-07 19:25:01
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笨笨的宝贝

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270(金币+1): 谢谢 2011-12-21 19:02:17
建议不要直接用纯甲醇冲,若流动相里有盐缓冲液或者离子对试剂的话,可以先用10%的甲醇冲洗一至两小时,然后再过渡到纯甲醇冲洗。
现在这种情况,建议先用0.2的10%甲醇冲过夜试试,或者走梯度,从10%的甲醇走到纯甲醇试试。
仅供参考....
总有那么一个想要遗忘,却又念念不忘的人.....
5楼2011-11-08 14:03:12
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Dragulia

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270(金币+1): 谢谢 2011-12-21 19:02:28
你先自己拆拆试试看看到底是柱子的问题还是管路的问题(我就遇到过一次管路堵的事情),做过盐的流动相吗?如果是盐堵的话,那甲醇冲是没用的,可以试试用50℃的温水慢慢冲一下看看
6楼2011-11-08 15:58:20
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zxjml2526

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 谢谢 2011-12-21 19:02:40
你查看一下,是不是泵头堵了,卸下来超声一下!
或把柱子倒过来用10%的甲醇或乙腈低流速冲洗2~4小时,
像楼上说的用温水冲洗也可!
7楼2011-12-21 15:43:25
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100(金币+1): 3Q 2012-01-19 23:53:46
也有一种可能,你把柱头的筛板卸下来超声下试试,看是不是筛板堵了
分离、分离
8楼2011-12-21 19:03:26
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caobing4

铁杆木虫 (著名写手)

学习了,好帖子
9楼2012-01-19 13:14:07
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2010062014

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我碰到过类似情况,用什么冲都不顶事,后来用100%正己烷冲,完了柱压降了一些,试试看呗
10楼2012-01-19 19:09:08
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